Եթերային յուղերի սիներգետիկ ազդեցությունը մեծահասակների վրա մեծացնում է պերմետրինի թունավորությունը Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)-ի նկատմամբ։

Թաիլանդում տեղական սննդի վերամշակման գործարաններում մոծակների առկայության փորձարկման նախորդ նախագծում պարզվել է, որ Cyperus rotundus-ի, գալանգալի և դարչինի եթերային յուղերը (EOs) լավ հակամոծակային ակտիվություն ունեն Aedes aegypti-ի դեմ: Ավանդական օգտագործումը նվազեցնելու փորձի շրջանակներում...միջատասպաններև կայուն մոծակների պոպուլյացիաների վերահսկումը բարելավելու համար, այս ուսումնասիրության նպատակն էր բացահայտել էթիլեն օքսիդի հասուններին սպանող ազդեցությունների և պերմետրինի թունավորության միջև հնարավոր սիներգիզմը Aedes aegypti մոծակների, այդ թվում՝ պիրետրոիդներին դիմացկուն և զգայուն շտամների համար։
Գնահատելու համար C. rotundus և A. galanga մոծակների կեղևից և C. verum կեղևից արդյունահանված EO-ի քիմիական կազմը և սպանող ակտիվությունը՝ Muang Chiang Mai (MCM-S) զգայուն շտամի և Pang Mai Dang (PMD-R) դիմացկուն շտամի դեմ: ) Մեծահասակ ակտիվ Ae. Aedes aegypti: Այս Aedes մոծակների վրա իրականացվել է նաև EO-պերմետրին խառնուրդի չափահաս կենսափորձարկում՝ դրա սիներգետիկ ակտիվությունը հասկանալու համար: aegypti շտամներ:
Քիմիական բնութագրումը GC-MS վերլուծական մեթոդով ցույց տվեց, որ C. rotundus, A. galanga և C. verum էկոհամակարգերից նույնականացվել է 48 միացություն, որոնք կազմում են ընդհանուր բաղադրիչների համապատասխանաբար 80.22%-ը, 86.75%-ը և 97.24%-ը: Կիպերենի (14.04%), β-բիսաբոլենի (18.27%) և ցինամալդեհիդի (64.66%) հիմնական բաղադրիչներն են համապատասխանաբար ցիպերուսի յուղի, գալանգալի յուղի և բալզամիկ յուղի: Կենսաբանական չափահասների սպանության փորձարկումներում C. rotundus, A. galanga և C. verum էկոհամակարգերը արդյունավետ էին Ae. aegypti-ի, MCM-S և PMD-R LD50 արժեքները համապատասխանաբար կազմել են 10.05 և 9.57 մկգ/մգ էգի, 7.97 և 7.94 մկգ/մգ էգի և 3.30 և 3.22 մկգ/մգ էգի սպանության համար: Այս միկրոօրգանիզմներում չափահաս aegypti-ի սպանության գործում MCM-S-ի և PMD-R Ae-ի արդյունավետությունը մոտ էր պիպերոնիլ բուտօքսիդին (PBO արժեքներ, LD50 = համապատասխանաբար 6.30 և 4.79 մկգ/մգ էգ), բայց ոչ այնքան արտահայտված, որքան պերմետրինը (LD50 արժեքներ = համապատասխանաբար 0.44 և 3.70 նգ/մգ էգ): Այնուամենայնիվ, համակցված կենսափորձարկումները ցույց են տվել սիներգիա EO-ի և պերմետրինի միջև: Պերմետրինի հետ նշանակալի սիներգիա է նկատվել Aedes մոծակների երկու շտամների դեմ: Aedes aegypti-ի EM-ում նկատվել է նշանակալի սիներգիա: C. rotundus և A. galanga յուղերի ավելացումը զգալիորեն նվազեցրեց պերմետրինի LD50 արժեքները MCM-S-ի վրա՝ համապատասխանաբար 0.44-ից մինչև 0.07 նգ/մգ և 0.11 նգ/մգ էգերի մոտ՝ համապատասխանաբար 6.28 և 4.00 սիներգիայի հարաբերակցության արժեքներով։ Բացի այդ, C. rotundus և A. galanga EO-ները նույնպես զգալիորեն նվազեցրին պերմետրինի LD50 արժեքները PMD-R-ի վրա՝ համապատասխանաբար 3.70-ից մինչև 0.42 նգ/մգ և 0.003 նգ/մգ էգերի մոտ՝ համապատասխանաբար 8.81 և 1233.33 SR արժեքներով։
EO-պերմետրին համակցության սիներգիստական ​​ազդեցությունը՝ Aedes մոծակների երկու շտամների դեմ մեծահասակների թունավորությունը բարձրացնելու համար: Aedes aegypti-ն ցուցադրում է էթիլենօքսիդի խոստումնալից դերը որպես սիներգիստ՝ մոծակների դեմ պայքարի արդյունավետությունը բարձրացնելու գործում, հատկապես այն դեպքերում, երբ ավանդական միացությունները անարդյունավետ կամ անտեղի են:
Aedes aegypti մոծակը (Diptera: Culicidae) դենգեի տենդի և այլ վարակիչ վիրուսային հիվանդությունների, ինչպիսիք են դեղին տենդը, չիկունգունիան և Զիկա վիրուսը, հիմնական տարածողն է, որը հսկայական և մշտական ​​սպառնալիք է ներկայացնում մարդկանց համար [1, 2]: Դենգեի վիրուսը մարդկանց վրա ազդող ամենալուրջ պաթոգեն արյունազեղ տենդն է, որի տարեկան գնահատվում է 5-100 միլիոն դեպք, և աշխարհում ավելի քան 2.5 միլիարդ մարդ ռիսկի տակ է [3]: Այս վարակիչ հիվանդության բռնկումները մեծ բեռ են դնում արևադարձային երկրների մեծ մասի բնակչության, առողջապահական համակարգերի և տնտեսությունների վրա [1]: Թաիլանդի առողջապահության նախարարության տվյալներով՝ 2015 թվականին ամբողջ երկրում գրանցվել է դենգեի տենդի 142,925 դեպք և 141 մահ, ինչը 2014 թվականի դեպքերի և մահերի թվից ավելի քան երեք անգամ ավելի է [4]: ​​Պատմական ապացույցներին հակառակ, դենգեի տենդը վերացվել կամ զգալիորեն նվազել է Aedes մոծակի շնորհիվ: Aedes aegypti-ի դեմ պայքարից հետո [5] վարակի մակարդակը կտրուկ աճել է, և հիվանդությունը տարածվել է ամբողջ աշխարհում, մասամբ՝ տասնամյակների գլոբալ տաքացման պատճառով: Ae. Aedes aegypti-ի վերացումը և վերահսկումը համեմատաբար դժվար է, քանի որ այն տնային մոծակ-փոխադրող է, որը օրվա ընթացքում զուգավորվում, սնվում, հանգստանում և ձվադրում է մարդկային բնակավայրերում և դրանց շրջակայքում: Բացի այդ, այս մոծակն ունի հարմարվելու բնական իրադարձությունների (օրինակ՝ երաշտի) կամ մարդկային վերահսկողության միջոցառումների պատճառով առաջացած շրջակա միջավայրի փոփոխություններին կամ խանգարումներին և կարող է վերադառնալ իր սկզբնական թվաքանակին [6, 7]: Քանի որ դենգեի տենդի դեմ պատվաստանյութերը վերջերս են հաստատվել, և դենգեի տենդի համար հատուկ բուժում չկա, դենգեի փոխանցման ռիսկի կանխարգելումը և նվազեցումը ամբողջությամբ կախված է մոծակ-փոխադրողների վերահսկումից և մարդկանց շփումը փոխանցողների հետ վերացնելուց:
Մասնավորապես, մոծակների դեմ պայքարի համար քիմիական նյութերի օգտագործումը այժմ կարևոր դեր է խաղում հանրային առողջապահության մեջ՝ որպես համապարփակ ինտեգրված վեկտորային կառավարման կարևոր բաղադրիչ: Ամենատարածված քիմիական մեթոդները ներառում են ցածր թունավորությամբ միջատասպանների օգտագործումը, որոնք գործում են մոծակների թրթուրների (լարվիցիդներ) և չափահաս մոծակների (ադիդոցիդներ) դեմ: Թրթուրների դեմ պայքարը աղբյուրի կրճատման և քիմիական լարվիցիդների, ինչպիսիք են օրգանոֆոսֆատները և միջատների աճի կարգավորիչները, կանոնավոր օգտագործման միջոցով համարվում է կարևոր: Այնուամենայնիվ, սինթետիկ թունաքիմիկատների և դրանց աշխատատար և բարդ պահպանման հետ կապված բացասական շրջակա միջավայրի վրա ազդեցությունը մնում է լուրջ մտահոգության առարկա [8, 9]: Ավանդական ակտիվ վեկտորային պայքարը, ինչպիսին է չափահասների դեմ պայքարը, մնում է վիրուսային բռնկումների ժամանակ վերահսկողության ամենաարդյունավետ միջոցը, քանի որ այն կարող է արագ և մեծ մասշտաբով վերացնել վարակիչ հիվանդությունների վեկտորները, ինչպես նաև կրճատել տեղական վեկտորային պոպուլյացիաների կյանքի տևողությունը և երկարակեցությունը [3]: Քիմիական միջատասպանների չորս դաս՝ օրգանոքլորներ (որոնք կոչվում են միայն ԴԴՏ), օրգանոֆոսֆատներ, կարբամատներ և պիրետրոիդներ, կազմում են վեկտորային պայքարի ծրագրերի հիմքը, որտեղ պիրետրոիդները համարվում են ամենահաջողակ դասը: Դրանք բարձր արդյունավետություն ունեն տարբեր հոդվածոտանիների դեմ և ցածր թունավորություն ունեն կաթնասունների համար: Ներկայումս սինթետիկ պիրետրոիդները կազմում են առևտրային թունաքիմիկատների մեծ մասը՝ կազմելով համաշխարհային թունաքիմիկատների շուկայի մոտ 25%-ը [11, 12]: Պերմետրինը և դելտամետրինը լայն սպեկտրի պիրետրոիդ միջատասպաններ են, որոնք տասնամյակներ շարունակ օգտագործվել են ամբողջ աշխարհում՝ գյուղատնտեսական և բժշկական նշանակություն ունեցող տարբեր վնասատուների դեմ պայքարելու համար [13, 14]: 1950-ական թվականներին ԴԴՏ-ն ընտրվեց որպես Թաիլանդի ազգային հանրային առողջապահության մոծակների դեմ պայքարի ծրագրի նախընտրելի քիմիական նյութ: Մալարիայի էնդեմիկ տարածքներում ԴԴՏ-ի լայնորեն կիրառումից հետո Թաիլանդը 1995-2000 թվականների միջև աստիճանաբար դադարեցրեց ԴԴՏ-ի օգտագործումը և այն փոխարինեց երկու պիրետրոիդներով՝ պերմետրինով և դելտամետրինով [15, 16]: Այս պիրետրոիդ միջատասպանները ներդրվել են 1990-ականների սկզբին՝ մալարիայի և դենգեի տենդի դեմ պայքարելու համար, հիմնականում՝ անկողնային ցանցերի միջոցով, ջերմային մառախուղի և գերցածր թունավորության սփրեյների միջոցով [14, 17]: Սակայն դրանք կորցրել են իրենց արդյունավետությունը՝ մոծակների նկատմամբ ուժեղ դիմադրության և հանրային առողջության և սինթետիկ քիմիական նյութերի շրջակա միջավայրի վրա ազդեցության վերաբերյալ մտահոգությունների պատճառով։ Սա լուրջ մարտահրավերներ է առաջացնում սպառնալիքի վեկտորների դեմ պայքարի ծրագրերի հաջողության համար [14, 18, 19]: Ռազմավարությունն ավելի արդյունավետ դարձնելու համար անհրաժեշտ են ժամանակին և համապատասխան հակազդեցություններ: Առաջարկվող կառավարման ընթացակարգերը ներառում են բնական նյութերի փոխարինում, տարբեր դասերի քիմիական նյութերի ռոտացիա, սիներգիստների ավելացում և քիմիական նյութերի խառնում կամ տարբեր դասերի քիմիական նյութերի միաժամանակյա կիրառում [14, 20, 21]: Հետևաբար, անհրաժեշտ է գտնել և մշակել էկոլոգիապես մաքուր, հարմար և արդյունավետ այլընտրանք և սիներգիստ, և այս ուսումնասիրությունը նպատակ ունի լուծել այս կարիքը:
Բնական ծագում ունեցող միջատասպանները, մասնավորապես բուսական բաղադրիչների վրա հիմնվածները, ներուժ են ցուցաբերել մոծակների դեմ պայքարի ներկա և ապագա այլընտրանքների գնահատման գործում [22, 23, 24]: Մի շարք ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ հնարավոր է վերահսկել մոծակների կարևոր վեկտորներին՝ օգտագործելով բուսական արտադրանք, մասնավորապես եթերային յուղեր (EOs), որպես չափահաս սպանողներ: Որոշ կարևոր մոծակների տեսակների դեմ չափահաս սպանող հատկություններ հայտնաբերվել են բազմաթիվ բուսական յուղերում, ինչպիսիք են նեխուրը, չամանը, զեդոարիան, անիսոնը, պղպեղը, չամանը, Schinus terebinthifolia-ն, Cymbopogon citratus-ը, Cymbopogon schoenanthus-ը, Cymbopogon giganteus-ը, Chenopodium ambrosioides-ը, Cochlospermum planchonii-ն, Eucalyptus ter eticornis-ը, Eucalyptus citriodora-ն, Cananga odorata-ն և Petroselinum Criscum-ը [25,26,27,28,29,30]: Էթիլենօքսիդն այժմ օգտագործվում է ոչ միայն ինքնուրույն, այլև բուսական նյութերի կամ առկա սինթետիկ թունաքիմիկատների հետ համատեղ՝ առաջացնելով տարբեր աստիճանի թունավորություն: Ավանդական միջատասպանների, ինչպիսիք են օրգանոֆոսֆատները, կարբամատները և պիրետրոիդները, համակցությունները էթիլենօքսիդի/բույսերի քաղվածքների հետ գործում են սիներգիստորեն կամ անտագոնիստորեն իրենց թունավոր ազդեցություններով և ցույց են տվել իրենց արդյունավետությունը հիվանդությունների կրողների և վնասատուների դեմ [31,32,33,34,35]: Այնուամենայնիվ, սինթետիկ քիմիական նյութերով կամ առանց դրանց ֆիտոքիմիկատների համակցությունների սիներգիստ թունավոր ազդեցությունների վերաբերյալ ուսումնասիրությունների մեծ մասը կատարվել է գյուղատնտեսական միջատների կրողների և վնասատուների վրա, այլ ոչ թե բժշկական առումով կարևոր մոծակների վրա: Ավելին, բույսերի և սինթետիկ միջատասպանների համակցությունների սիներգիստ ազդեցությունների վերաբերյալ մոծակների կրողների դեմ աշխատանքների մեծ մասը կենտրոնացած է թրթուրասպան ազդեցության վրա:
Հեղինակների կողմից Թաիլանդի տեղական սննդամթերքի բույսերից ստացված միջատասպանների հետազոտման ընթացիկ հետազոտական ​​նախագծի շրջանակներում անցկացված նախորդ ուսումնասիրության մեջ, Cyperus rotundus-ի, գալանգալի և դարչինի էթիլենի օքսիդները պոտենցիալ ակտիվություն են ցուցաբերել չափահաս Aedes. Egypti մոծակների դեմ [36]: Հետևաբար, այս ուսումնասիրության նպատակն էր գնահատել այս բուժիչ բույսերից անջատված EO-ների արդյունավետությունը Aedes մոծակների. aegypti-ի, այդ թվում՝ պիրետրոիդների նկատմամբ դիմացկուն և զգայուն շտամների դեմ: Վերլուծվել է նաև էթիլենի օքսիդի և սինթետիկ պիրետրոիդների երկուական խառնուրդների սիներգետիկ ազդեցությունը, որոնք լավ արդյունավետություն ունեն մեծահասակների մոտ,՝ ավանդական միջատասպանների օգտագործումը նվազեցնելու և մոծակների վեկտորների նկատմամբ, մասնավորապես՝ Aedes. Aedes aegypti-ի դեմ, դիմադրությունը բարձրացնելու համար: Այս հոդվածը ներկայացնում է արդյունավետ եթերային յուղերի քիմիական բնութագրումը և դրանց ներուժը՝ բարձրացնելու սինթետիկ պերմետրինի թունավորությունը Aedes մոծակների. aegypti-ի դեմ պիրետրոիդների նկատմամբ զգայուն շտամներում (MCM-S) և դիմացկուն շտամներում (PMD-R):
Եթերայուղի արդյունահանման համար օգտագործվող C. rotundus և A. galanga կոճղարմատները և C. verum-ի կեղևը (Նկ. 1) գնվել են Թաիլանդի Չիանգ Մայ նահանգի բուսական դեղամիջոցների մատակարարներից: Այս բույսերի գիտական ​​​​իդենտիֆիկացումը կատարվել է Չիանգ Մայի համալսարանի (CMU) Գիտությունների քոլեջի կենսաբանության ամբիոնի հերբարիումի բուսաբան պարոն Ջեյմս Ֆրանկլին Մաքսվելի և գիտնական Վանարի Չարոենսապի հետ խորհրդակցությունների միջոցով. Քարնեգի Մելոն համալսարանի Դեղագործության քոլեջի դեղագործության ֆակուլտետում յուրաքանչյուր բույսի տիկին Վաուչերի նմուշները պահվում են Քարնեգի Մելոն համալսարանի բժշկական դպրոցի մակաբուծաբանության ամբիոնում՝ ապագա օգտագործման համար:
Բույսերի նմուշները 3-5 օրվա ընթացքում առանձին-առանձին չորացվել են ստվերում բաց տարածքում՝ ակտիվ օդափոխությամբ և մոտավորապես 30 ± 5 °C շրջակա միջավայրի ջերմաստիճանում՝ բնական եթերայուղերի (ԷՕ) արդյունահանումից առաջ խոնավությունը հեռացնելու համար: Յուրաքանչյուր չոր բուսական նյութից ընդհանուր առմամբ 250 գ մեխանիկորեն մանրացվել է կոպիտ փոշու և օգտագործվել է եթերայուղերը (ԷՕ) գոլորշու թորման միջոցով մեկուսացնելու համար: Թորման սարքը բաղկացած էր էլեկտրական տաքացման թիկնոցից, 3000 մլ կլոր հատակով սրվակից, արդյունահանման սյունակից, խտացուցիչից և Cool ace սարքից (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Տոկիո, Ճապոնիա): Սրվին ավելացրեք 1600 մլ թորած ջուր և 10-15 ապակե գնդիկ, այնուհետև էլեկտրական տաքացուցիչով տաքացրեք այն մինչև մոտավորապես 100°C առնվազն 3 ժամ, մինչև թորումն ավարտվի և ԷՕ այլևս չարտադրվի: EO շերտը ջրային փուլից առանձնացվել է բաժանիչ ձագարի միջոցով, չորացվել է անջուր նատրիումի սուլֆատի (Na2SO4) վրա և պահվել է փակ շագանակագույն շշի մեջ 4°C ջերմաստիճանում, մինչև քիմիական բաղադրությունը և հասուն մասնիկի ակտիվությունը ուսումնասիրվել են։
Եթերային յուղերի քիմիական կազմը որոշվել է չափահաս նյութի կենսավերլուծության հետ միաժամանակ։ Որակական վերլուծությունը կատարվել է GC-MS համակարգի միջոցով, որը բաղկացած է Hewlett-Packard (Վիլմինգտոն, Կալիֆոռնիա, ԱՄՆ) 7890A գազային քրոմատոգրաֆից, որը հագեցած է մեկ քառաբևեռ զանգվածային ընտրողական դետեկտորով (Agilent Technologies, Վիլմինգտոն, Կալիֆոռնիա, ԱՄՆ) և MSD 5975C (EI) (Agilent Technologies):
Քրոմատոգրաֆիկ սյուն – DB-5MS (30 մ × ներքին տրամագիծ 0.25 մմ × թաղանթի հաստություն 0.25 մկմ): ԳԿ-ՄՍ ընդհանուր աշխատանքային ժամանակը 20 րոպե էր: Վերլուծության պայմաններն են՝ ներարկիչի և փոխանցման գծի ջերմաստիճանները համապատասխանաբար 250 և 280 °C են, վառարանի ջերմաստիճանը սահմանվում է 50°C-ից մինչև 250°C 10°C/րոպե արագությամբ բարձրանալու համար, կրող գազը հելիում է, հոսքի արագությունը՝ 1.0 մլ/րոպե, ներարկման ծավալը՝ 0.2 մկլ (CH2Cl2-ի 1/10% ծավալային հարաբերակցությամբ, բաժանման հարաբերակցությունը՝ 100:1): ԳԿ-ՄՍ հայտնաբերման համար օգտագործվում է էլեկտրոնային իոնացման համակարգ՝ 70 էՎ իոնացման էներգիայով: Ձեռքբերման միջակայքը 50–550 ատոմային զանգվածային միավոր է (ամմ), իսկ սկանավորման արագությունը՝ 2.91 սկանավորում վայրկյանում: Բաղադրիչների հարաբերական տոկոսները արտահայտվում են որպես գագաթնակետի մակերեսով նորմալացված տոկոսներ: EO բաղադրիչների նույնականացումը հիմնված է դրանց պահպանման ինդեքսի (RI) վրա: RI-ն հաշվարկվել է Վան դեն Դուլի և Կրացի [37] հավասարման միջոցով n-ալկանների շարքի (C8-C40) համար և համեմատվել է գրականության [38] և գրադարանային տվյալների բազաների (NIST 2008 և Wiley 8NO8) պահպանման ինդեքսների հետ: Ներկայացված միացությունների ինքնությունը, ինչպիսիք են կառուցվածքը և մոլեկուլային բանաձևը, հաստատվել է առկա իսկական նմուշների հետ համեմատությամբ:
Սինթետիկ պերմետրինի և պիպերոնիլ բուտօքսիդի (PBO, դրական վերահսկողություն սիներգիայի ուսումնասիրություններում) վերլուծական ստանդարտները գնվել են Sigma-Aldrich-ից (Սենթ Լուիս, Միսսուրի, ԱՄՆ): Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպության (ԱՀԿ) մեծահասակների թեստավորման հավաքածուները և պերմետրինով ներծծված թղթի ախտորոշիչ դեղաչափերը (0.75%) առևտրային կարգով գնվել են Մալայզիայի Պենանգ քաղաքում գտնվող ԱՀԿ վեկտորների վերահսկման կենտրոնից: Օգտագործված մնացած բոլոր քիմիական նյութերն ու ռեակտիվները վերլուծական որակի էին և գնվել էին Թաիլանդի Չիանգ Մայ նահանգի տեղական հաստատություններից:
Մեծահասակների կենսափորձարկման մեջ որպես փորձարկվող օրգանիզմներ օգտագործված մոծակները ազատորեն զուգավորվող լաբորատոր Aedes մոծակներ էին։ aegypti, այդ թվում՝ զգայուն Muang Chiang Mai շտամը (MCM-S) և դիմացկուն Pang Mai Dang շտամը (PMD-R): MCM-S շտամը ստացվել է Թաիլանդի Չիանգ Մայ նահանգի Մուանգ Չիանգ Մայ տարածքում հավաքված տեղական նմուշներից և 1995 թվականից ի վեր պահվում է CMU բժշկական դպրոցի մակաբուծաբանության ամբիոնի միջատաբանության սենյակում [39]: PMD-R շտամը, որը, ինչպես պարզվել է, դիմացկուն է պերմետրինի նկատմամբ, մեկուսացվել է դաշտային մոծակներից, որոնք սկզբնապես հավաքվել են Չիանգ Մայ նահանգի Մաե Տանգ շրջանի Բան Պանգ Մայ Դանգից, Թաիլանդ, և պահվում է նույն ինստիտուտում 1997 թվականից ի վեր [40]: PMD-R շտամները աճեցվել են ընտրողական ճնշման տակ՝ դիմադրության մակարդակը պահպանելու համար՝ 0.75% պերմետրինի պարբերաբար ազդեցության միջոցով՝ օգտագործելով ԱՀԿ հայտնաբերման հավաքածուն՝ որոշ փոփոխություններով [41]: Ae-ի յուրաքանչյուր շտամ... Aedes aegypti-ն անհատապես գաղութացվել է պաթոգեններից զերծ լաբորատորիայում՝ 25 ± 2 °C ջերմաստիճանում և 80 ± 10% հարաբերական խոնավության պայմաններում, ինչպես նաև 14:10 ժամ լույս/մութ լուսապաշարի պայմաններում: Մոտավորապես 200 թրթուր պահվել է պլաստիկե սկուտեղների մեջ (33 սմ երկարությամբ, 28 սմ լայնությամբ և 9 սմ բարձրությամբ), որոնք լցված են եղել ծորակի ջրով՝ յուրաքանչյուր սկուտեղի համար 150-200 թրթուրի խտությամբ, և օրական երկու անգամ կերակրվել են ստերիլիզացված շան համար նախատեսված թխվածքաբլիթներով: Մեծահասակ որդերը պահվել են խոնավ վանդակներում և անընդհատ կերակրվել են 10% ջրային սախարոզի լուծույթով և 10% մուլտիվիտամինային օշարակի լուծույթով: Էգ մոծակները պարբերաբար արյուն են ծծում ձվադրելու համար: Երկու-հինգ օրական էգերը, որոնք արյունով չեն կերակրվել, կարող են անընդհատ օգտագործվել փորձարարական չափահաս կենսաբանական փորձարկումներում:
Ածխաթթու գազի (CO2) անզգայացումից հետո մոծակները կշռվել են անհատապես։ Անզգայացված մոծակները անշարժ են պահվել չոր ֆիլտրի թղթի վրա՝ հատուկ սառը ափսեի վրա՝ ստերեոմիկրոսկոպի տակ՝ ընթացակարգի ընթացքում վերաակտիվացումը կանխելու համար։ Յուրաքանչյուր մշակման համար էգի վերին նախամորթին քսվել է 0.1 մկլ EO լուծույթ՝ օգտագործելով Hamilton ձեռքի միկրոդիսպենսեր (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, USA)։ Յուրաքանչյուր կոնցենտրացիայով բուժվել է քսանհինգ էգ, որոնց մահացությունը տատանվել է 10%-ից մինչև 95%՝ առնվազն 4 տարբեր կոնցենտրացիաների դեպքում։ Լուծիչով մշակված մոծակները ծառայել են որպես վերահսկիչ։ Փորձարկվող նմուշների աղտոտումը կանխելու համար յուրաքանչյուր փորձարկվող EO-ի համար ֆիլտրի թուղթը փոխարինեք նոր ֆիլտրի թղթով: Այս կենսափորձարկումներում օգտագործվող դեղաչափերը արտահայտվում են EO-ի միկրոգրամներով՝ կենդանի էգի մարմնի քաշի մեկ միլիգրամի դիմաց: Մեծահասակ PBO-ի ակտիվությունը նույնպես գնահատվել է EO-ի նման ձևով, որտեղ PBO-ն օգտագործվել է որպես դրական վերահսկողություն սիներգետիկ փորձերում: Բոլոր խմբերի բուժված մոծակները տեղադրվել են պլաստիկ բաժակների մեջ և ստացել 10% սախարոզա գումարած 10% մուլտիվիտամինային օշարակ: Բոլոր կենսափորձարկումները կատարվել են 25 ± 2 °C ջերմաստիճանում և 80 ± 10% հարաբերական խոնավության պայմաններում և կրկնվել են չորս անգամ վերահսկիչ խմբի հետ: 24-ժամյա բուծման ժամանակահատվածում մահացությունը ստուգվել և հաստատվել է մոծակի մեխանիկական խթանմանը արձագանքի բացակայությամբ, ապա գրանցվել է չորս կրկնությունների միջինի հիման վրա: Փորձարարական մշակումները կրկնվել են չորս անգամ յուրաքանչյուր փորձարկվող նմուշի համար՝ օգտագործելով մոծակների տարբեր խմբաքանակներ: Արդյունքները ամփոփվել և օգտագործվել են մահացության տոկոսային մակարդակը հաշվարկելու համար, որն օգտագործվել է պրոբիտ վերլուծության միջոցով 24-ժամյա մահացու դոզան որոշելու համար:
EO-ի և պերմետրինի սիներգիստական ​​հակամանրէային ազդեցությունը գնահատվել է տեղային թունավորության փորձարկման ընթացակարգի միջոցով [42], ինչպես նկարագրվել է նախկինում: Պերմետրինը ցանկալի կոնցենտրացիայով պատրաստելու համար որպես լուծիչ օգտագործվել է ացետոն կամ էթանոլ, ինչպես նաև EO-ի և պերմետրինի երկուական խառնուրդ (EO-պերմետրին. պերմետրին խառնված EO-ի հետ LD25 կոնցենտրացիայով): Փորձարկման հավաքածուները (պերմետրին և EO-պերմետրին) գնահատվել են Ae. Aedes aegypti-ի MCM-S և PMD-R շտամների նկատմամբ: 25 էգ մոծակներից յուրաքանչյուրին տրվել է պերմետրինի չորս դեղաչափ՝ չափահասներին սպանելու արդյունավետությունը ստուգելու համար, յուրաքանչյուր մշակումը կրկնվել է չորս անգամ: EO-ի սիներգիստ թեկնածուներին նույնականացնելու համար 25 էգ մոծակներից յուրաքանչյուրին տրվել է EO-պերմետրինի 4-ից 6 դեղաչափ, յուրաքանչյուր մշակումը կրկնվել է չորս անգամ: PBO-պերմետրինի մշակումը (պերմետրին խառնված PBO-ի LD25 կոնցենտրացիայի հետ) նույնպես ծառայել է որպես դրական վերահսկողություն: Այս կենսափորձարկումներում օգտագործվող դեղաչափերը արտահայտվում են փորձարկման նմուշի նանոգրամներով՝ կենդանի էգի մարմնի քաշի մեկ միլիգրամի դիմաց: Յուրաքանչյուր մոծակի շտամի համար իրականացվել է չորս փորձարարական գնահատում՝ անհատապես բուծված խմբաքանակների վրա, և մահացության տվյալները համախմբվել և վերլուծվել են Probit-ի միջոցով՝ 24-ժամյա մահացու դեղաչափը որոշելու համար:
Մահացության մակարդակը ճշգրտվել է Աբբոտի բանաձևով [43]: Կարգավորված տվյալները վերլուծվել են Probit ռեգրեսիոն վերլուծության միջոցով՝ օգտագործելով SPSS համակարգչային վիճակագրության ծրագիրը (տարբերակ 19.0): Մահացու արժեքները՝ համապատասխանաբար 25%, 50%, 90%, 95% և 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 և LD99), հաշվարկվել են համապատասխան 95% վստահության միջակայքերի միջոցով (95% վստահության միջակայք): Փորձարկվող նմուշների միջև նշանակալիության և տարբերությունների չափումները գնահատվել են յուրաքանչյուր կենսաբանական փորձարկման շրջանակներում՝ օգտագործելով խի-քառակուսի թեստը կամ Մանն-Ուիթնիի U թեստը: Արդյունքները համարվել են վիճակագրորեն նշանակալի P-ում:< 0.05: Դիմադրության գործակիցը (RR) գնահատվում է LD50 մակարդակում՝ օգտագործելով հետևյալ բանաձևը [12]:
RR > 1-ը ցույց է տալիս դիմադրություն, իսկ RR ≤ 1-ը՝ զգայունություն: Յուրաքանչյուր սիներգիստ թեկնածուի սիներգիայի հարաբերակցության (SR) արժեքը հաշվարկվում է հետևյալ կերպ [34, 35, 44]:
Այս գործոնը արդյունքները բաժանում է երեք կատեգորիայի՝ 1±0.05 SR արժեքը համարվում է առանց որևէ ակնհայտ ազդեցության, 1.05-ից բարձր SR արժեքը համարվում է սիներգետիկ ազդեցություն ունեցող, իսկ A բաց դեղին հեղուկ յուղի SR արժեքը կարելի է ստանալ C. rotundus և A. galanga կոճղարմատների և C. verum կեղևի գոլորշու թորման միջոցով: Չոր քաշի վրա հաշվարկված ելքերը համապատասխանաբար կազմել են 0.15%, 0.27% (w/w) և 0.54% (v/v): (Աղյուսակ 1): C. rotundus, A. galanga և C. verum յուղերի քիմիական կազմի GC-MS ուսումնասիրությունը ցույց է տվել 19, 17 և 21 միացությունների առկայություն, որոնք համապատասխանաբար կազմել են բոլոր բաղադրիչների 80.22, 86.75 և 97.24%-ը (Աղյուսակ 2): C. lucidum կոճղարմատի յուղի միացությունները հիմնականում բաղկացած են ցիպերոնենից (14.04%), որին հաջորդում են կարալենը (9.57%), α-կապսելանը (7.97%) և α-կապսելանը (7.53%): Գալանգալի կոճղարմատի յուղի հիմնական քիմիական բաղադրիչը β-բիսաբոլենն է (18.27%), որին հաջորդում են α-բերգամոտենը (16.28%), 1,8-ցինոլը (10.17%) և պիպերոնոլը (10.09%): Մինչդեռ ցինամալդեհիդը (64.66%) նույնականացվել է որպես C. verum կեղևի յուղի հիմնական բաղադրիչ, ցինամալդեհիդը (6.61%), α-կոպաենը (5.83%) և 3-ֆենիլպրոպիոնալդեհիդը (4.09%) համարվել են երկրորդական բաղադրիչներ: Կիպերնի, β-բիսաբոլենի և ցինամալդեհիդի քիմիական կառուցվածքները համապատասխանաբար C. rotundus-ի, A. galanga-ի և C. verum-ի հիմնական միացություններն են, ինչպես ցույց է տրված նկար 2-ում:
Երեք OO-ների արդյունքները գնահատել են չափահասների ակտիվությունը Aedes մոծակների դեմ: aegypti մոծակների դեմ բոլոր EO-ները մահացու ազդեցություն են ունեցել MCM-S Aedes մոծակների վրա՝ տարբեր տեսակների և դեղաչափերի դեպքում: Aedes aegypti: Ամենաարդյունավետ EO-ն C. verum-ն է, որին հաջորդում են A. galanga-ն և C. rotundus-ը՝ համապատասխանաբար 3.30, 7.97 և 10.05 մկգ/մգ MCM-S էգերի մոտ LD50 արժեքներով, ինչը մի փոքր ավելի բարձր է, քան 3.22 (U = 1 ), Z = -0.775, P = 0.667), 7.94 (U = 2, Z = 0, P = 1) և 9.57 (U = 0, Z = -1.549, P = 0.333) μg/մգ PMD -R-ը կանանց մոտ: Սա համապատասխանում է այն բանին, որ PBO-ն մի փոքր ավելի բարձր ազդեցություն ունի PMD-R-ի վրա, քան MSM-S շտամը՝ համապատասխանաբար 4.79 և 6.30 մկգ/մգ LD50 արժեքներով էգերի մոտ (U = 0, Z = -2.021, P = 0.057): Կարելի է հաշվարկել, որ C. verum, A. galanga, C. rotundus և PBO-ի LD50 արժեքները PMD-R-ի նկատմամբ մոտավորապես 0.98, 0.99, 0.95 և 0.76 անգամ ցածր են, քան MCM-S-ի նկատմամբ: Այսպիսով, սա ցույց է տալիս, որ PBO-ի և EO-ի նկատմամբ զգայունությունը համեմատաբար նման է երկու Aedes շտամների միջև: Չնայած PMD-R-ն ավելի զգայուն էր, քան MCM-S-ը, Aedes aegypti-ի զգայունությունը նշանակալի չէր: Ի տարբերություն դրա, երկու Aedes շտամները մեծապես տարբերվում էին պերմետրինի նկատմամբ իրենց զգայունությամբ: aegypti (աղյուսակ 4): PMD-R-ը ցույց տվեց պերմետրինի նկատմամբ զգալի դիմադրողականություն (կանանց մոտ LD50 արժեքը = 0.44 նգ/մգ), որի LD50 արժեքը ավելի բարձր էր՝ 3.70, համեմատած MCM-S-ի (կանանց մոտ LD50 արժեքը = 0.44 նգ/մգ) նգ/մգ կանանց մոտ (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029): Չնայած PMD-R-ը շատ ավելի քիչ զգայուն է պերմետրինի նկատմամբ, քան MCM-S-ը, դրա զգայունությունը PBO-ի և C. verum, A. galanga և C. rotundus յուղերի նկատմամբ մի փոքր ավելի բարձր է, քան MCM-S-ը:
Ինչպես դիտարկվել է չափահաս բնակչության EO-պերմետրին համակցության կենսափորձարկման ժամանակ, պերմետրինի և EO-ի երկուական խառնուրդները (LD25) ցույց են տվել կամ սիներգիա (SR արժեք > 1.05) կամ ազդեցություն չունենալ (SR արժեք = 1 ± 0.05): EO-պերմետրին խառնուրդի բարդ ազդեցությունները մեծահասակների վրա փորձարարական ալբինոս մոծակների վրա: Aedes aegypti MCM-S և PMD-R շտամները ներկայացված են աղյուսակ 4-ում և նկար 3-ում: Պարզվել է, որ C. verum յուղի ավելացումը փոքր-ինչ նվազեցնում է պերմետրինի LD50-ը MCM-S-ի դեմ և փոքր-ինչ բարձրացնում LD50-ը PMD-R-ի դեմ համապատասխանաբար մինչև 0.44–0.42 նգ/մգ կանանց մոտ և 3.70-ից մինչև 3.85 նգ/մգ կանանց մոտ: Ի հակադրություն, C. rotundus և A. galanga յուղերի ավելացումը զգալիորեն նվազեցրել է պերմետրինի LD50-ը MCM-S-ի վրա 0.44-ից մինչև 0.07 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) և մինչև 0.11 (U = 0): , Z) = -2.309, P = 0.029) նգ/մգ կանանց մոտ: MCM-S-ի LD50 արժեքների հիման վրա, C. rotundus և A. galanga յուղերի ավելացումից հետո EO-պերմետրին խառնուրդի SR արժեքները համապատասխանաբար կազմել են 6.28 և 4.00: Համապատասխանաբար, պերմետրինի LD50-ը PMD-R-ի նկատմամբ զգալիորեն նվազել է 3.70-ից մինչև 0.42 (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) և մինչև 0.003՝ C. rotundus և A. galanga յուղերի ավելացման դեպքում (U = 0): , Z = -2.337, P = 0.029) նգ/մգ էգ: C. rotundus-ի հետ համակցված պերմետրինի SR արժեքը PMD-R-ի նկատմամբ կազմել է 8.81, մինչդեռ գալանգալ-պերմետրին խառնուրդի SR արժեքը կազմել է 1233.33: MCM-S-ի համեմատ, դրական վերահսկիչ PBO-ի LD50 արժեքը նվազել է 0.44-ից մինչև 0.26 նգ/մգ (էգեր) և 3.70 նգ/մգ-ից (էգեր) մինչև 0.65 նգ/մգ (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029) և PMD-R-ի համար (U = 0, Z = -2.309, P = 0.029): PBO-պերմետրին խառնուրդի SR արժեքները MCM-S և PMD-R շտամների համար համապատասխանաբար կազմել են 1.69 և 5.69: Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ C. rotundus և A. galanga յուղերը և PBO-ն ավելի մեծ չափով են ուժեղացնում պերմետրինի թունավորությունը, քան C. verum յուղը MCM-S և PMD-R շտամների համար:
EO-ի, PBO-ի, պերմետրինի (PE) և դրանց համակցությունների հասուն օրգանիզմների ակտիվությունը (LD50) Aedes մոծակների պիրետրոիդների նկատմամբ զգայուն (MCM-S) և դիմացկուն (PMD-R) շտամների դեմ: Aedes aegypti
[45] Սինթետիկ պիրետրոիդները ամբողջ աշխարհում օգտագործվում են գրեթե բոլոր գյուղատնտեսական և բժշկական նշանակություն ունեցող հոդվածոտանիների դեմ պայքարելու համար: Այնուամենայնիվ, սինթետիկ միջատասպանների օգտագործման վնասակար հետևանքների պատճառով, մասնավորապես՝ մոծակների զարգացման և լայնածավալ դիմադրության, ինչպես նաև երկարատև առողջության և շրջակա միջավայրի վրա ազդեցության առումով, այժմ անհրաժեշտ է կրճատել ավանդական սինթետիկ միջատասպանների օգտագործումը և մշակել այլընտրանքներ [35, 46, 47]: Բացի շրջակա միջավայրի և մարդու առողջության պաշտպանությունից, բուսական միջատասպանների առավելություններից են բարձր ընտրողականությունը, համաշխարհային մատչելիությունը և արտադրության ու օգտագործման հեշտությունը, ինչը դրանք ավելի գրավիչ է դարձնում մոծակների դեմ պայքարի համար [32,48, 49]: Այս ուսումնասիրությունը, բացի արդյունավետ եթերայուղերի քիմիական բնութագրերի GC-MS վերլուծության միջոցով պարզաբանելուց, նաև գնահատել է չափահաս եթերայուղերի ազդեցությունը և սինթետիկ պերմետրին aegypti-ի թունավորությունը բարձրացնելու դրանց ունակությունը պիրետրոիդների նկատմամբ զգայուն (MCM-S) և դիմացկուն շտամներում (PMD-R):
Գլյուկոզա-ՄՇ բնութագրումը ցույց տվեց, որ ցիպերնը (14.04%), β-բիսաբոլենը (18.27%) և ցինամալդեհիդը (64.66%) համապատասխանաբար C. rotundus, A. galanga և C. verum յուղերի հիմնական բաղադրիչներն են: Այս քիմիական նյութերը ցուցաբերել են բազմազան կենսաբանական ակտիվություն: Ահնը և այլք [50] հաղորդել են, որ C. rotundus-ի կոճղարմատից անջատված 6-ացետօքսիցիպերենը գործում է որպես հակաուռուցքային միացություն և կարող է առաջացնել կասպազ-կախյալ ապոպտոզ ձվարանների քաղցկեղի բջիջներում: Զմուռնի ծառի եթերայուղից արդյունահանված β-բիսաբոլենը ցուցաբերում է յուրահատուկ ցիտոտոքսիկություն մարդու և մկան կրծքագեղձի ուռուցքային բջիջների նկատմամբ՝ թե՛ in vitro, թե՛ in vivo պայմաններում [51]: Բնական քաղվածքներից ստացված կամ լաբորատորիայում սինթեզված ցինամալդեհիդը, ըստ հաղորդումների, ունի միջատասպան, հակաբակտերիալ, հակասնկային, հակաբորբոքային, իմունոմոդուլյատոր, հակաուռուցքային և հակաանգիոգենային ակտիվություն [52]:
Մեծահասակների մոտ դեղաչափից կախված ակտիվության կենսափորձարկման արդյունքները ցույց տվեցին փորձարկված EO-ների լավ ներուժը և ցույց տվեցին, որ Aedes մոծակների MCM-S և PMD-R շտամները նմանատիպ զգայունություն ունեին EO-ի և PBO-ի նկատմամբ: Aedes aegypti: EO-ի և պերմետրինի արդյունավետության համեմատությունը ցույց տվեց, որ վերջինս ունի ավելի ուժեղ ալերգենիկ ազդեցություն. LD50 արժեքները համապատասխանաբար 0.44 և 3.70 նգ/մգ ենգ շտամների համար MCM-S և PMD-R-ի համար: Այս արդյունքները հաստատվում են բազմաթիվ ուսումնասիրություններով, որոնք ցույց են տալիս, որ բնական ծագման թունաքիմիկատները, մասնավորապես բուսական ծագում ունեցող արտադրանքը, ընդհանուր առմամբ պակաս արդյունավետ են, քան սինթետիկ նյութերը [31, 34, 35, 53, 54]: Սա կարող է պայմանավորված լինել նրանով, որ առաջինը ակտիվ կամ ոչ ակտիվ բաղադրիչների բարդ համադրություն է, մինչդեռ երկրորդը՝ մաքրված մեկ ակտիվ միացություն: Այնուամենայնիվ, բնական ակտիվ բաղադրիչների բազմազանությունը և բարդությունը՝ գործողության տարբեր մեխանիզմներով, կարող են ուժեղացնել կենսաբանական ակտիվությունը կամ խոչընդոտել դիմադրության զարգացումը տեր պոպուլյացիաներում [55, 56, 57]: Շատ հետազոտողներ հաղորդել են C. verum, A. galanga և C. rotundus-ի և դրանց բաղադրիչների, ինչպիսիք են β-բիսաբոլենը, ցինամալդեհիդը և 1,8-ցինոլը, հակամոծակային ներուժի մասին [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63, 64]: Այնուամենայնիվ, գրականության վերանայումը ցույց է տվել, որ նախկինում չեն եղել հաղորդագրություններ պերմետրինի կամ այլ սինթետիկ միջատասպանների հետ Aedes մոծակների դեմ դրա սիներգետիկ ազդեցության մասին: Aedes aegypti:
Այս ուսումնասիրության մեջ պերմետրինի նկատմամբ զգայունության զգալի տարբերություններ են նկատվել Aedes Aedes aegypti-ի երկու շտամների միջև: MCM-S-ը զգայուն է պերմետրինի նկատմամբ, մինչդեռ PMD-R-ը շատ ավելի քիչ զգայուն է՝ 8.41 դիմադրության մակարդակով: MCM-S-ի զգայունության համեմատ, PMD-R-ը պակաս զգայուն է պերմետրինի նկատմամբ, բայց ավելի զգայուն է EO-ի նկատմամբ, ինչը հիմք է հանդիսանում հետագա ուսումնասիրությունների համար, որոնք ուղղված են պերմետրինի արդյունավետության բարձրացմանը՝ այն EO-ի հետ համատեղելով: Մեծահասակների վրա ազդեցության սիներգետիկ համակցված կենսափորձարկումը ցույց է տվել, որ EO-ի և պերմետրինի երկուական խառնուրդները նվազեցրել կամ մեծացրել են չափահաս Aedes Aegypti շտամների մահացությունը: C. verum յուղի ավելացումը փոքր-ինչ նվազեցրել է պերմետրինի LD50-ը MCM-S-ի նկատմամբ, բայց փոքր-ինչ մեծացրել է LD50-ը PMD-R-ի նկատմամբ՝ համապատասխանաբար 1.05 և 0.96 SR արժեքներով: Սա ցույց է տալիս, որ C. verum յուղը պերմետրինի վրա սիներգիստական ​​կամ անտագոնիստական ​​ազդեցություն չունի MCM-S-ի և PMD-R-ի վրա փորձարկվելիս: Ի տարբերություն դրա, C. rotundus և A. galanga յուղերը ցույց են տվել զգալի սիներգիստական ​​ազդեցություն՝ զգալիորեն նվազեցնելով պերմետրինի LD50 արժեքները MCM-S-ի կամ PMD-R-ի վրա: Երբ պերմետրինը համակցվել է C. rotundus-ի և A. galanga-ի EO-պերմետրին խառնուրդի SR արժեքները MCM-S-ի համար համապատասխանաբար կազմել են 6.28 և 4.00: Բացի այդ, երբ պերմետրինը գնահատվել է PMD-R-ի նկատմամբ C. rotundus-ի (SR = 8.81) կամ A. galanga-ի (SR = 1233.33) հետ համատեղ, SR արժեքները զգալիորեն աճել են: Հարկ է նշել, որ և՛ C. rotundus-ը, և՛ A. galanga-ն զգալիորեն մեծացրել են պերմետրինի թունավորությունը PMD-R Ae. aegypti-ի նկատմամբ: Նմանապես, պարզվել է, որ PBO-ն մեծացնում է պերմետրինի թունավորությունը՝ համապատասխանաբար 1.69 և 5.69 SR արժեքներով MCM-S և PMD-R շտամների համար: Քանի որ C. rotundus-ը և A. galanga-ն ունեին ամենաբարձր SR արժեքները, դրանք համարվում էին լավագույն սիներգիստները համապատասխանաբար MCM-S-ի և PMD-R-ի վրա պերմետրինի թունավորությունը մեծացնելու գործում:
Նախորդ մի քանի ուսումնասիրություններում ներկայացվել է սինթետիկ միջատասպանների և բույսերի քաղվածքների համադրությունների սիներգիստական ​​ազդեցությունը տարբեր մոծակների տեսակների դեմ: Կալայանասունդարամի և Դասի [65] կողմից Anopheles Stephensi-ի դեմ ուսումնասիրված թրթուրասպան կենսափորձը ցույց է տվել, որ ֆենթիոնը, որը լայն սպեկտրի օրգանոֆոսֆատ է, կապված է Cleodendron inerme-ի, Pedalium murax-ի և Parthenium hysterophorus-ի հետ: Քաղվածքների միջև նկատվել է նշանակալի սիներգիա՝ համապատասխանաբար 1.31, 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 և 2.23 սիներգիստական ​​ազդեցությամբ (SF): 15 մանգրովային տեսակների թրթուրասպան սկրինինգում մանգրովային արմատների նավթային եթերի քաղվածքը առավել արդյունավետ է եղել Culex quinquefasciatus-ի դեմ՝ LC50 արժեքով 25.7 մգ/լ [66]: Այս քաղվածքի և բուսական պիրեթրումի միջատասպանի սիներգիստական ​​ազդեցությունը նույնպես նվազեցրել է պիրեթրումի LC50-ը ​​C. quinquefasciatus թրթուրների դեմ 0.132 մգ/լ-ից մինչև 0.107 մգ/լ, բացի այդ, այս ուսումնասիրության մեջ օգտագործվել է 1.23 SF հաշվարկ։ 34,35,44]: Գնահատվել է Solanum կիտրոնի արմատի քաղվածքի և մի քանի սինթետիկ միջատասպանների (օրինակ՝ ֆենթիոն, ցիպերմետրին (սինթետիկ պիրետրոիդ) և timethphos (օրգանոֆոսֆորային թրթուրասպան)) համակցված արդյունավետությունը Anopheles մոծակների դեմ: Stephensi [54] և C. quinquefasciatus [34]: Ցիպերմետրինի և դեղին մրգի նավթային եթերի քաղվածքի համակցված օգտագործումը ցույց է տվել ցիպերմետրինի վրա սիներգիստական ​​ազդեցություն բոլոր հարաբերակցություններով: Ամենաարդյունավետ հարաբերակցությունը 1:1 բինար համադրությունն էր՝ համապատասխանաբար 0.0054 ppm և 6.83 LC50 և SF արժեքներով, համեմատած An. Stephen West-ի [54] հետ։ Մինչդեռ S. xanthocarpum-ի և temephos-ի 1:1 բինար խառնուրդը անտագոնիստ էր (SF = 0.6406), S. xanthocarpum-ֆենթիոն համադրությունը (1:1) ցուցաբերեց սիներգետիկ ակտիվություն C. quinquefasciatus-ի դեմ՝ 1.3125 SF-ով [34]։ Տոնգը և Բլոմկվիստը [35] ուսումնասիրել են բույսերի էթիլենօքսիդի ազդեցությունը կարբարիլի (լայն սպեկտրի կարբամատ) և պերմետրինի թունավորության վրա Aedes մոծակների համար։ Aedes aegypti։ Արդյունքները ցույց տվեցին, որ ագարից, սև պղպեղից, գիհուից, հելիքրիսումից, սանդալափայտից և քնջութից ստացված էթիլենօքսիդը մեծացնում է կարբարիլի թունավորությունը Aedes մոծակների համար։ aegypti թրթուրների SR արժեքները տատանվում են 1.0-ից մինչև 7.0: Ի տարբերություն դրա, EO-ներից ոչ մեկը թունավոր չէր Aedes չափահաս մոծակների համար: Այս փուլում Aedes aegypti-ի և EO-կարբարիլի համադրության համար սիներգետիկ ազդեցություններ չեն հայտնաբերվել: PBO-ն օգտագործվել է որպես դրական վերահսկողություն՝ Aedes մոծակների դեմ կարբարիլի թունավորությունը բարձրացնելու համար: Aedes aegypti թրթուրների և չափահաս մոծակների SR արժեքները համապատասխանաբար 4.9-9.5 և 2.3 են: Թրթուրասպան ակտիվության համար փորձարկվել են միայն պերմետրինի և EO-ի կամ PBO-ի երկուական խառնուրդները: EO-պերմետրին խառնուրդն ունեցել է անտագոնիստական ​​ազդեցություն, մինչդեռ PBO-պերմետրին խառնուրդն ունեցել է սիներգիստական ​​ազդեցություն Aedes մոծակների դեմ: Aedes aegypti-ի թրթուրներ: Այնուամենայնիվ, PBO-պերմետրին խառնուրդների դեղաչափի արձագանքի փորձեր և SR գնահատում դեռևս չեն իրականացվել: Չնայած մոծակների վեկտորների դեմ ֆիտոսինթետիկ համակցությունների սիներգետիկ ազդեցության վերաբերյալ քիչ արդյունքներ են ձեռք բերվել, այս տվյալները հաստատում են առկա արդյունքները, որոնք բացում են սիներգիստներ ավելացնելու հեռանկար՝ ոչ միայն կիրառվող դեղաչափը նվազեցնելու, այլև սպանող ազդեցությունը մեծացնելու համար: Միջատների արդյունավետությունը: Բացի այդ, այս ուսումնասիրության արդյունքները առաջին անգամ ցույց տվեցին, որ C. rotundus և A. galanga յուղերը սիներգիստորեն զգալիորեն ավելի բարձր արդյունավետություն են ցուցաբերում Aedes մոծակների պիրետրոիդների նկատմամբ զգայուն և պիրետրոիդների նկատմամբ դիմացկուն շտամների դեմ՝ համեմատած PBO-ի հետ, երբ դրանք համակցվում են պերմետրինի թունավորության հետ: Aedes aegypti: Այնուամենայնիվ, սիներգիստական ​​​​վերլուծության անսպասելի արդյունքները ցույց տվեցին, որ C. verum յուղն ունի ամենամեծ հակամեծահասակային ակտիվությունը երկու Aedes շտամների դեմ: Հետաքրքիր է, որ պերմետրինի թունավոր ազդեցությունը Aedes aegypti-ի վրա անբավարար էր: Թունավոր և սիներգիստական ​​​​ազդեցությունների տատանումները կարող են մասամբ պայմանավորված լինել այս յուղերում կենսաակտիվ բաղադրիչների տարբեր տեսակների և մակարդակների ազդեցությամբ:
Չնայած արդյունավետությունը բարելավելու ուղիները հասկանալու ջանքերին, սիներգետիկ մեխանիզմները մնում են անհասկանալի: Տարբեր արդյունավետության և սիներգետիկ ներուժի հնարավոր պատճառները կարող են ներառել փորձարկված արտադրանքի քիմիական կազմի տարբերությունները և մոծակների նկատմամբ զգայունության տարբերությունները՝ կապված դիմադրության կարգավիճակի և զարգացման հետ: Այս ուսումնասիրության մեջ փորձարկված էթիլենօքսիդի հիմնական և երկրորդական բաղադրիչների միջև կան տարբերություններ, և այս միացություններից մի քանիսը, ինչպես ցույց է տրվել, ունեն վանող և թունավոր ազդեցություններ տարբեր վնասատուների և հիվանդությունների վեկտորների դեմ [61,62,64,67,68]: Այնուամենայնիվ, C. rotundus, A. galanga և C. verum յուղերում բնութագրվող հիմնական միացությունները, ինչպիսիք են ցիպերնը, β-բիսաբոլենը և ցինամալդեհիդը, այս հոդվածում չեն փորձարկվել համապատասխանաբար Ae-ի դեմ իրենց հակամեծահասակային և սիներգետիկ ակտիվության համար: Aedes aegypti: Հետևաբար, անհրաժեշտ են ապագա ուսումնասիրություններ՝ յուրաքանչյուր եթերային յուղում առկա ակտիվ բաղադրիչները մեկուսացնելու և դրանց միջատասպան արդյունավետությունը և սիներգետիկ փոխազդեցությունները այս մոծակի վեկտորի դեմ պարզաբանելու համար: Ընդհանուր առմամբ, միջատասպան ակտիվությունը կախված է թույների և միջատների հյուսվածքների միջև գործողությունից և ռեակցիայից, որը կարելի է պարզեցնել և բաժանել երեք փուլի՝ ներթափանցում միջատի մարմնի մաշկի և թիրախային օրգանների թաղանթների մեջ, ակտիվացում (= փոխազդեցություն թիրախի հետ) և թունավոր նյութերի դետոքսիկացիա [57, 69]: Հետևաբար, միջատասպանների սիներգիզմը, որը հանգեցնում է թունավոր նյութերի համակցությունների արդյունավետության բարձրացմանը, պահանջում է այս կատեգորիաներից առնվազն մեկը, ինչպիսիք են՝ ներթափանցման ավելացումը, կուտակված միացությունների ավելի մեծ ակտիվացումը կամ թունաքիմիկատների ակտիվ բաղադրիչի դետոքսիկացիայի պակաս նվազեցումը: Օրինակ, էներգիայի հանդուրժողականությունը հետաձգում է կուտիկուլայի ներթափանցումը հաստացած կուտիկուլայի միջով և կենսաքիմիական դիմադրությունը, ինչպիսին է միջատասպանների նյութափոխանակության ուժեղացումը, որը դիտվում է որոշ դիմացկուն միջատների շտամներում [70, 71]: ԷՕ-ների նշանակալի արդյունավետությունը պերմետրինի թունավորությունը մեծացնելու գործում, հատկապես PMD-R-ի դեմ, կարող է ցույց տալ միջատասպանների նկատմամբ դիմադրության խնդրի լուծումը՝ դիմադրության մեխանիզմների հետ փոխազդեցության միջոցով [57, 69, 70, 71]: Տոնգը և Բլոմկվիստը [35] հիմնավորել են այս ուսումնասիրության արդյունքները՝ ցույց տալով ԷՕ-ների և սինթետիկ թունաքիմիկատների միջև սիներգիստական ​​փոխազդեցությունը: aegypti-ի մոտ կան ապացույցներ դետոքսիկացնող ֆերմենտների, այդ թվում՝ ցիտոքրոմ P450 մոնոօքսիգենազների և կարբօքսիլեսթերազների դեմ արգելակող ակտիվության մասին, որոնք սերտորեն կապված են ավանդական թունաքիմիկատների նկատմամբ դիմադրողականության զարգացման հետ: Ասում են, որ PBO-ն ոչ միայն ցիտոքրոմ P450 մոնոօքսիգենազի նյութափոխանակության արգելակիչ է, այլև բարելավում է միջատասպանների ներթափանցումը, ինչը ցույց է տալիս դրա օգտագործումը որպես դրական վերահսկողություն սիներգետիկ ուսումնասիրություններում [35, 72]: Հետաքրքիր է, որ գալանգալի յուղի մեջ հանդիպող կարևոր բաղադրիչներից մեկը՝ 1,8-ցինոլը, հայտնի է միջատների տեսակների վրա իր թունավոր ազդեցությամբ [22, 63, 73] և, ըստ հաղորդումների, ունի սիներգետիկ ազդեցություն կենսաբանական ակտիվության հետազոտության մի քանի ոլորտներում [74]: . ,75,76,77]: Բացի այդ, 1,8-ցինոլը տարբեր դեղամիջոցների, այդ թվում՝ կուրկումինի [78], 5-ֆտորուրացիլի [79], մեֆենամիկ թթվի [80] և զիդովուդինի [81] հետ համատեղ նույնպես ունի թափանցելիությունը խթանող ազդեցություն in vitro պայմաններում: Այսպիսով, 1,8-ցինոլի հնարավոր դերը սիներգիստական ​​միջատասպան ազդեցության մեջ ոչ միայն որպես ակտիվ բաղադրիչ է, այլև որպես թափանցելիության ուժեղացուցիչ: Պերմետրինի հետ ավելի մեծ սիներգիզմի շնորհիվ, հատկապես PMD-R-ի դեմ, այս ուսումնասիրության մեջ դիտարկված գալանգալի յուղի և տրիխոզանթես յուղի սիներգիստական ​​ազդեցությունները կարող են առաջանալ դիմադրության մեխանիզմների հետ փոխազդեցությունից, այսինքն՝ քլորի նկատմամբ թափանցելիության բարձրացման հետևանքով: Պիրետրոիդները մեծացնում են կուտակված միացությունների ակտիվացումը և արգելակում են դետոքսիկացնող ֆերմենտները, ինչպիսիք են ցիտոքրոմ P450 մոնոօքսիգենազները և կարբօքսիլեսթերազները: Այնուամենայնիվ, այս ասպեկտները պահանջում են հետագա ուսումնասիրություն՝ EO-ի և դրա մեկուսացված միացությունների (առանձին կամ համակցված) հատուկ դերը սիներգիստական ​​մեխանիզմներում պարզաբանելու համար:
1977 թվականին Թաիլանդի հիմնական վեկտորային պոպուլյացիաներում հաղորդվել է պերմետրինի նկատմամբ դիմադրության մակարդակի աճի մասին, և հաջորդ տասնամյակների ընթացքում պերմետրինի օգտագործումը մեծապես փոխարինվեց այլ պիրետրոիդային քիմիական նյութերով, մասնավորապես՝ դելտամետրինով փոխարինվածներով [82]: Այնուամենայնիվ, դելտամետրինի և միջատասպանների այլ դասերի նկատմամբ վեկտորային դիմադրողականությունը չափազանց տարածված է ամբողջ երկրում՝ չափազանց և անընդհատ օգտագործման պատճառով [14, 17, 83, 84, 85, 86]: Այս խնդրի դեմ պայքարելու համար խորհուրդ է տրվում պտտել կամ վերօգտագործել նախկինում արդյունավետ և կաթնասունների համար պակաս թունավոր դեն նետված թունաքիմիկատները, ինչպիսին է պերմետրինը: Ներկայումս, չնայած պերմետրինի օգտագործումը նվազել է վերջին ազգային կառավարության մոծակների դեմ պայքարի ծրագրերում, պերմետրինի նկատմամբ դիմադրողականությունը դեռևս կարելի է գտնել մոծակների պոպուլյացիաներում: Սա կարող է պայմանավորված լինել մոծակների կողմից առևտրային կենցաղային վնասատուների դեմ պայքարի միջոցների ազդեցության տակ, որոնք հիմնականում բաղկացած են պերմետրինից և այլ պիրետրոիդներից [14, 17]: Այսպիսով, պերմետրինի հաջող վերօգտագործումը պահանջում է վեկտորային դիմադրողականությունը նվազեցնելու ռազմավարությունների մշակում և իրականացում: Չնայած այս ուսումնասիրության մեջ առանձին փորձարկված եթերային յուղերից ոչ մեկը այնքան արդյունավետ չէր, որքան պերմետրինը, պերմետրինի հետ համատեղ աշխատելը հանգեցրեց տպավորիչ սիներգետիկ ազդեցության: Սա խոստումնալից ցուցանիշ է, որ EO-ի փոխազդեցությունը դիմադրության մեխանիզմների հետ հանգեցնում է նրան, որ պերմետրինի և EO-ի համակցությունը ավելի արդյունավետ է, քան միջատասպանը կամ առանձին EO-ն, մասնավորապես PMD-R Ae. Aedes aegypti-ի դեմ: Սիներգետիկ խառնուրդների առավելությունները արդյունավետության բարձրացման գործում, չնայած վեկտորների վերահսկման համար ավելի ցածր դեղաչափերի օգտագործմանը, կարող են հանգեցնել դիմադրության կառավարման բարելավմանը և ծախսերի կրճատմանը [33, 87]: Այս արդյունքներից հաճելի է նշել, որ A. galanga և C. rotundus EO-ները զգալիորեն ավելի արդյունավետ էին, քան PBO-ն՝ պերմետրինի թունավորության սիներգիայի հարցում՝ թե՛ MCM-S, թե՛ PMD-R շտամներում, և՛ PMD-R շտամներում, և հանդիսանում են ավանդական էրգոգեն օժանդակ միջոցների պոտենցիալ այլընտրանք:
Ընտրված EO-ները նշանակալի սիներգետիկ ազդեցություն ունեցան PMD-R Ae. aegypti-ի, մասնավորապես գալանգալի յուղի նկատմամբ մեծահասակների թունավորությունը բարձրացնելու գործում, որի SR արժեքը մինչև 1233.33 է, ինչը ցույց է տալիս, որ EO-ն լայն հեռանկար ունի որպես սիներգիստ պերմետրինի արդյունավետությունը բարձրացնելու գործում: Սա կարող է խթանել նոր ակտիվ բնական արտադրանքի օգտագործումը, որոնք միասին կարող են մեծացնել բարձր արդյունավետությամբ մոծակների դեմ պայքարի միջոցների օգտագործումը: Այն նաև բացահայտում է էթիլեն օքսիդի ներուժը որպես այլընտրանքային սիներգիստ՝ արդյունավետորեն բարելավելու հին կամ ավանդական միջատասպանները՝ լուծելու մոծակների պոպուլյացիաների առկա դիմադրության խնդիրները: Մոծակների դեմ պայքարի ծրագրերում հեշտությամբ հասանելի բույսերի օգտագործումը ոչ միայն նվազեցնում է ներմուծվող և թանկարժեք նյութերից կախվածությունը, այլև խթանում է հանրային առողջապահական համակարգերը ամրապնդելու տեղական ջանքերը:
Այս արդյունքները հստակ ցույց են տալիս էթիլենօքսիդի և պերմետրինի համադրության կողմից առաջացած նշանակալի սիներգիստական ​​ազդեցությունը: Արդյունքները ընդգծում են էթիլենօքսիդի ներուժը որպես բույսերի սիներգիստ մոծակների դեմ պայքարում, մեծացնելով պերմետրինի արդյունավետությունը մոծակների դեմ, հատկապես դիմացկուն պոպուլյացիաների մոտ: Ապագա զարգացումներն ու հետազոտությունները կպահանջեն գալանգալի և ալպինիայի յուղերի և դրանց մեկուսացված միացությունների սիներգիստական ​​կենսավերլուծություն, բնական կամ սինթետիկ ծագման միջատասպանների համադրություններ մոծակների բազմաթիվ տեսակների և փուլերի դեմ, և թունավորության փորձարկումներ ոչ թիրախային օրգանիզմների դեմ: Էթիլենօքսիդի գործնական կիրառումը որպես կենսունակ այլընտրանքային սիներգիստ:
Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպություն։ Դենգեի կանխարգելման և վերահսկման գլոբալ ռազմավարություն 2012–2020 թվականներին։ Ժնև. Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպություն, 2012։
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al. Զիկա վիրուս. պատմություն, առաջացում, կենսաբանություն և վերահսկման հեռանկարներ. Հակավիրուսային հետազոտություն. 2016; 130:69–80.
Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպություն։ Դենգեի տենդի մասին տեղեկատվական թերթիկ։ 2016թ.։ http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/։ Մուտք գործելու ամսաթիվ՝ 20 հունվարի, 2017թ.
Հանրային առողջապահության դեպարտամենտ։ Դենգեի տենդի և դենգեի հեմոռագիկ տենդի դեպքերի ներկայիս վիճակը Թաիլանդում։ 2016թ. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf։ Մուտք գործելու ամսաթիվ՝ 2017թ. հունվարի 6։
Օի Ի.Է., Գոհ Ս.Տ., Գաբլեր Դ.Ջ.: Դենգեի տենդի կանխարգելման և վեկտորների վերահսկման 35 տարի Սինգապուրում: Հանկարծակի վարակիչ հիվանդություն: 2006;12:887–93:
Մորիսոն Ա.Կ., Զիելինսկի-Գուտիերես Ե., Սքոթ Թ.Վ., Ռոզենբերգ Ռ.: Aedes aegypti վիրուսային վեկտորների վերահսկման մարտահրավերների բացահայտում և լուծումների առաջարկ: PLOS Medicine. 2008;5:362–6:
Հիվանդությունների վերահսկման և կանխարգելման կենտրոններ։ Դենգեի տենդ, միջատաբանություն և էկոլոգիա։ 2016։ http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/։ Մուտք գործելու ամսաթիվ՝ 2017 թվականի հունվարի 6։
Օհիմայն Է.Ի., Անգայե Թ.Կ.Ն., Բասսի Ս.Ե. Jatropa curcas (Euphorbiaceae) տերևների, կեղևի, ցողունների և արմատների թրթուրասպան ակտիվության համեմատություն մալարիայի վեկտոր Anopheles gambiae-ի դեմ: SZhBR. 2014;3:29-32:
Սոլեյմանի-Ահմադի Մ., Վաթանդուստ Հ., Զարեհ Մ. Անոֆելեսի թրթուրների բնակավայրի բնութագրերը հարավարևելյան Իրանի մալարիայի վերացման ծրագրի շրջանակներում մալարիայի տարածքներում: Ասիա-խաղաղօվկիանոսյան J Trop Biomed. 2014;4 (Լրացում 1):S73–80.
Բելլինի Ռ., Զելլեր Հ., Վան Բորտել Վ. Վեկտորների վերահսկման, Արևմտյան Նեղոսի վիրուսի բռնկումների կանխարգելման և վերահսկման մոտեցումների վերանայում, ինչպես նաև Եվրոպայի առջև ծառացած մարտահրավերներ: Մակաբույծների վեկտոր: 2014;7:323:
Մութուսամի Ռ., Շիվակումար Մ.Ս. Կարմիր թրթուրների (Amsacta albistriga Walker) մոտ ցիպերմետրինի նկատմամբ դիմադրության ընտրությունը և մոլեկուլային մեխանիզմները։ Վնասատուների կենսաքիմիական ֆիզիոլոգիա։ 2014;117:54–61։
Ռամկումար Գ., Շիվակումար Մ.Ս. Culex quinquefasciatus-ի պերմետրինի նկատմամբ դիմադրության և այլ միջատասպանների նկատմամբ խաչաձև դիմադրության լաբորատոր ուսումնասիրություն: Պալաստոր հետազոտական ​​կենտրոն: 2015;114:2553–60:
Մացունակա Ս, Հաթսոն Դ.Հ., Մերֆի Ս.Դ.: Թունաքիմիկատների քիմիա. Մարդու բարեկեցություն և շրջակա միջավայր, հատոր 3. Գործողության մեխանիզմ, նյութափոխանակություն և տոքսիկոլոգիա: Նյու Յորք. Պերգամոն Պրես, 1983:
Չարեոնվիրիյաֆապ Տ., Բանգս Մ.Ջ., Սուվոնկերտ Վ., Կոնգմի Մ., Կորբել Ա.Վ., Նգոեն-Կլան Ռ. Թաիլանդում մարդկային հիվանդությունների վեկտորների միջատասպանների նկատմամբ դիմադրության և վարքային խուսափման վերանայում: Մակաբույծների վեկտոր: 2013;6:280:
Չարեոնվիրիյաֆպ Տ., Աում-Աունգ Բ., Ռատանաթհամ Ս. Թաիլանդում մոծակների միջատների նկատմամբ կայունության ներկայիս օրինաչափությունները: Հարավարևելյան Ասիայի J Trop Med Public Health. 1999;30:184-94:
Չարեոնվիրիյաֆապ Թ., Բանգս Մ.Ջ., Ռատանաթհամ Ս. Մալարիայի վիճակը Թաիլանդում: Հարավարևելյան Ասիա J Trop Med Public Health. 2000;31:225–37:
Պլերնսաբ Ս, Սաինգամսուկ Ջ, Յանոլա Ջ, Լումջուան Ն, Թիփավանկոսոլ Պ, Ուոլթոն Ս, Սոմբուն Պ. Թաիլանդի Չիանգ Մայ քաղաքում Aedes aegypti մոծակների մոտ F1534C և V1016G նոկդաուն դիմադրության մուտացիաների ժամանակային հաճախականությունը և մուտացիաների ազդեցությունը պիրետրոիդներ պարունակող ջերմային մշուշային սփրեյների արդյունավետության վրա: Ակտատրոպ. 2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Insecticide-ի դիմադրություն հիմնական դենգե վեկտորներում Aedes albopictus և Aedes aegypti: Վնասատուների կենսաքիմիական ֆիզիոլոգիա. 2012; 104:126–31.