Շնորհակալություն Nature.com կայք այցելելու համար: Ձեր օգտագործած դիտարկիչի տարբերակն ունի CSS-ի սահմանափակ աջակցություն: Լավագույն արդյունքի հասնելու համար խորհուրդ ենք տալիս օգտագործել ձեր դիտարկիչի ավելի նոր տարբերակը (կամ անջատել համատեղելիության ռեժիմը Internet Explorer-ում): Մինչ այդ, շարունակական աջակցությունն ապահովելու համար, մենք կայքը ցուցադրում ենք առանց ոճավորման կամ JavaScript-ի:
Բույսերից ստացված միջատասպան միացությունների համակցությունները կարող են ցուցաբերել սիներգետիկ կամ անտագոնիստական փոխազդեցություններ վնասատուների դեմ: Հաշվի առնելով Aedes մոծակների կողմից տարածվող հիվանդությունների արագ տարածումը և Aedes մոծակների պոպուլյացիաների ավանդական միջատասպանների նկատմամբ դիմադրողականության աճը, մշակվել և փորձարկվել են բույսերի եթերայուղերի վրա հիմնված տերպենային միացությունների քսանութ համակցություններ Aedes aegypti-ի թրթուրային և չափահաս փուլերի դեմ: Սկզբում գնահատվել են հինգ բուսական եթերայուղեր (EO)՝ դրանց թրթուրասպան և չափահասների համար օգտագործման արդյունավետության համար, և յուրաքանչյուր EO-ում նույնականացվել են երկու հիմնական միացություններ՝ հիմնվելով GC-MS արդյունքների վրա: Գնվել են հիմնական նույնականացված միացությունները՝ դիալիլ դիսուլֆիդ, դիալիլ տրիսուլֆիդ, կարվոն, լիմոնեն, էվգենոլ, մեթիլ էվգենոլ, էվկալիպտոլ, էվդեմոլ և մոծակների ալֆա-պինեն: Այնուհետև այս միացությունների երկուական համակցությունները պատրաստվել են ենթամահացու դեղաչափերով, և դրանց սիներգետիկ և անտագոնիստական ազդեցությունները փորձարկվել և որոշվել են: Լավագույն թրթուրասպան միացությունները ստացվում են լիմոնենը դիալիլ դիսուլֆիդի հետ խառնելով, իսկ լավագույն չափահասների դեմ պայքարի միացությունները՝ կարվոնը լիմոնենի հետ խառնելով: Առևտրային առումով օգտագործվող սինթետիկ թրթուրասպան Temphos-ը և չափահասների համար նախատեսված Malathion դեղամիջոցը փորձարկվել են առանձին և տերպենոիդների հետ երկուական համակցություններով: Արդյունքները ցույց են տվել, որ թեմեֆոսի և դիալիլ դիսուլֆիդի, ինչպես նաև մալաթիոնի և էուդեսմոլի համադրությունը ամենաարդյունավետ համադրությունն էր: Այս հզոր համակցությունները ներուժ ունեն Aedes aegypti-ի դեմ օգտագործելու համար:
Բույսերի եթերայուղերը (ԲԷ) երկրորդային մետաբոլիտներ են, որոնք պարունակում են տարբեր կենսաակտիվ միացություններ և ավելի ու ավելի կարևոր են դառնում որպես սինթետիկ թունաքիմիկատների այլընտրանք: Դրանք ոչ միայն էկոլոգիապես մաքուր և օգտագործողին հարմար են, այլև տարբեր կենսաակտիվ միացությունների խառնուրդ են, ինչը նաև նվազեցնում է դեղերի նկատմամբ դիմադրողականության զարգացման հավանականությունը1: GC-MS տեխնոլոգիայի միջոցով հետազոտողները ուսումնասիրել են տարբեր բույսերի եթերայուղերի բաղադրիչները և 17,500 արոմատիկ բույսերից նույնականացրել են ավելի քան 3000 միացություն2, որոնց մեծ մասը փորձարկվել է միջատասպան հատկությունների համար և, ըստ հաղորդումների, ունեն միջատասպան ազդեցություն3,4: Որոշ ուսումնասիրություններ ընդգծում են, որ միացության հիմնական բաղադրիչի թունավորությունը նույնն է կամ ավելի մեծ, քան դրա հում էթիլենօքսիդինը: Սակայն առանձին միացությունների օգտագործումը կարող է կրկին տեղ թողնել դիմադրողականության զարգացման համար, ինչպես դա տեղի է ունենում քիմիական միջատասպանների դեպքում5,6: Հետևաբար, ներկայումս ուշադրության կենտրոնում է էթիլենօքսիդի վրա հիմնված միացությունների խառնուրդների պատրաստումը՝ միջատասպան արդյունավետությունը բարելավելու և թիրախային վնասատուների պոպուլյացիաներում դիմադրողականության հավանականությունը նվազեցնելու համար: Էներգետիկ միացություններում առկա առանձին ակտիվ միացությունները կարող են ցուցաբերել սիներգետիկ կամ անտագոնիստական ազդեցություններ՝ համակցություններում, որոնք արտացոլում են Էներգետիկ միացության ընդհանուր ակտիվությունը, մի փաստ, որը լավ ընդգծվել է նախորդ հետազոտողների կողմից անցկացված ուսումնասիրություններում7,8: Վեկտորային վերահսկողության ծրագիրը ներառում է նաև Էներգետիկ միացությունը և դրա բաղադրիչները: Եթերային յուղերի մոծակասպան ակտիվությունը լայնորեն ուսումնասիրվել է Culex և Anopheles մոծակների վրա: Մի շարք ուսումնասիրություններ փորձել են մշակել արդյունավետ թունաքիմիկատներ՝ տարբեր բույսեր համատեղելով առևտրային օգտագործման սինթետիկ թունաքիմիկատների հետ՝ ընդհանուր թունավորությունը բարձրացնելու և կողմնակի ազդեցությունները նվազագույնի հասցնելու համար9: Սակայն Aedes aegypti-ի դեմ նման միացությունների ուսումնասիրությունները հազվադեպ են մնում: Բժշկական գիտության առաջընթացը և դեղերի ու պատվաստանյութերի մշակումը օգնել են պայքարել որոշ վեկտորային հիվանդությունների դեմ: Սակայն Aedes aegypti մոծակի կողմից փոխանցվող վիրուսի տարբեր սերոտիպերի առկայությունը հանգեցրել է պատվաստման ծրագրերի ձախողմանը: Հետևաբար, երբ նման հիվանդություններ են առաջանում, վեկտորային վերահսկողության ծրագրերը հիվանդության տարածումը կանխելու միակ տարբերակն են: Ներկայիս իրավիճակում Aedes aegypti-ի դեմ պայքարը շատ կարևոր է, քանի որ այն տարբեր վիրուսների և դրանց սերոտիպերի հիմնական տարածողն է, որոնք առաջացնում են դենգեի տենդ, Զիկա, դենգեի հեմոռագիկ տենդ, դեղին տենդ և այլն: Առավել ուշագրավն այն է, որ գրեթե բոլոր վեկտորային Aedes-ով փոխանցվող հիվանդությունների դեպքերի թիվը տարեցտարի աճում է Եգիպտոսում և աճում է ամբողջ աշխարհում: Հետևաբար, այս համատեքստում անհրաժեշտ է մշակել Aedes aegypti պոպուլյացիաների համար էկոլոգիապես մաքուր և արդյունավետ պայքարի միջոցառումներ: Այս առումով պոտենցիալ թեկնածուներ են EO-ները, դրանց բաղադրիչ միացությունները և դրանց համակցությունները: Հետևաբար, այս ուսումնասիրությունը փորձել է բացահայտել միջատասպան հատկություններ ունեցող հինգ բույսերից (օրինակ՝ անանուխ, սուրբ ռեհան, էվկալիպտի խայտաբղետ, ալիումի ծծումբ և մելալեուկա) բույսերի EO միացությունների արդյունավետ սիներգետիկ համակցություններ Aedes aegypti-ի դեմ:
Բոլոր ընտրված միկրոօրգանիզմները ցուցաբերել են Aedes aegypti-ի դեմ թրթուրասպան ակտիվություն՝ 24-ժամյա LC50-ով, որը տատանվում էր 0.42-ից մինչև 163.65 ppm: Ամենաբարձր թրթուրասպան ակտիվությունը գրանցվել է անանուխի (Mp) EO-ի համար՝ 0.42 ppm LC50 արժեքով 24 ժամվա ընթացքում, որին հաջորդում է սխտորը (As)՝ 16.19 ppm LC50 արժեքով 24 ժամվա ընթացքում (աղյուսակ 1):
Բացառությամբ Ocimum Sainttum-ի, Os EO-ի, մյուս չորս հետազոտված EO-ները ցույց տվեցին ակնհայտ ալերգիկ ազդեցություն՝ LC50 արժեքներով, որոնք տատանվում էին 23.37-ից մինչև 120.16 ppm 24-ժամյա ազդեցության ժամանակահատվածում: Thymophilus striata (Cl) EO-ն ամենաարդյունավետն էր չափահասներին սպանելու հարցում՝ LC50 արժեքով 23.37 ppm ազդեցությունից հետո 24 ժամվա ընթացքում, որին հաջորդում էր Eucalyptus maculata (Em)-ը, որն ուներ LC50 արժեք 101.91 ppm (աղյուսակ 1): Մյուս կողմից, Os-ի LC50 արժեքը դեռևս չի որոշվել, քանի որ ամենաբարձր դոզայի դեպքում գրանցվել է մահացության ամենաբարձր՝ 53% մակարդակը (Լրացուցիչ նկար 3):
Յուրաքանչյուր EO-ի երկու հիմնական բաղադրիչ միացությունները նույնականացվել և ընտրվել են NIST գրադարանի տվյալների բազայի արդյունքների, գազային քրոմատոգրամի մակերեսի տոկոսի և MS սպեկտրի արդյունքների հիման վրա (աղյուսակ 2): EO As-ի համար նույնականացված հիմնական միացություններն էին դիալիլ դիսուլֆիդը և դիալիլ տրիսուլֆիդը. EO Mp-ի համար նույնականացված հիմնական միացություններն էին կարվոնը և լիմոնենը, EO Em-ի համար նույնականացված հիմնական միացություններն էին էվդեսմոլը և էվկալիպտոլը. EO Os-ի համար նույնականացված հիմնական միացություններն էին էվգենոլը և մեթիլ էվգենոլը, իսկ EO Cl-ի համար նույնականացված հիմնական միացություններն էին էվգենոլը և α-պինենը (Նկար 1, Լրացուցիչ նկարներ 5–8, Լրացուցիչ աղյուսակ 1–5):
Ընտրված եթերային յուղերի հիմնական տերպենոիդների զանգվածային սպեկտրոմետրիայի արդյունքները (A-դիալիլ դիսուլֆիդ, B-դիալիլ տրիսուլֆիդ, C-էվգենոլ, D-մեթիլ էվգենոլ, E-լիմոնեն, F-արոմատիկ ցեպերոն, G-α-պինեն, H-ցինոլ, R-էվդամոլ):
Ընդհանուր առմամբ ինը միացություններ (դիալիլ դիսուլֆիդ, դիալիլ տրիսուլֆիդ, էվգենոլ, մեթիլ էվգենոլ, կարվոն, լիմոնեն, էվկալիպտոլ, էվդեսմոլ, α-պինեն) նույնականացվել են որպես արդյունավետ միացություններ, որոնք EO-ի հիմնական բաղադրիչներն են և անհատապես կենսափորձարկվել են Aedes aegypti-ի նկատմամբ թրթուրային փուլերում: Էվդեսմոլ միացությունն ունեցել է ամենաբարձր թրթուրասպան ակտիվությունը՝ LC50 արժեքով 2.25 ppm 24 ժամ ազդեցությունից հետո: Դիալիլ դիսուլֆիդ և դիալիլ տրիսուլֆիդ միացությունները նույնպես հայտնաբերվել են թրթուրասպան պոտենցիալ ազդեցություններով՝ միջին ենթամահացու դեղաչափերով 10-20 ppm միջակայքում: Միջին թրթուրասպան ակտիվություն կրկին նկատվել է էվգենոլ, լիմոնեն և էվկալիպտոլ միացությունների համար՝ LC50 արժեքներով՝ 63.35 ppm, 139.29 ppm: և 181.33 ppm 24 ժամ հետո, համապատասխանաբար (աղյուսակ 3): Այնուամենայնիվ, մեթիլ էվգենոլի և կարվոնի թրթուրասպան նշանակալի ներուժ չի հայտնաբերվել նույնիսկ ամենաբարձր դեղաչափերի դեպքում, ուստի LC50 արժեքները չեն հաշվարկվել (աղյուսակ 3): Սինթետիկ թրթուրասպան Temephos-ը Aedes aegypti-ի դեմ ունեցել է 0.43 ppm միջին մահացու կոնցենտրացիա 24 ժամվա ազդեցության ընթացքում (աղյուսակ 3, լրացուցիչ աղյուսակ 6):
Յոթ միացություններ (դիալիլ դիսուլֆիդ, դիալիլ տրիսուլֆիդ, էվկալիպտոլ, α-պինեն, էուդեսմոլ, լիմոնեն և կարվոն) նույնականացվել են որպես արդյունավետ EO-ի հիմնական միացություններ և անհատապես փորձարկվել են չափահաս եգիպտական Aedes մոծակների դեմ: Probit ռեգրեսիոն վերլուծության համաձայն, էուդեսմոլն ունեցել է ամենաբարձր պոտենցիալը՝ 1.82 ppm LC50 արժեքով, որին հաջորդում է էվկալիպտոլը՝ 17.60 ppm LC50 արժեքով 24-ժամյա ազդեցության ժամանակ: Մնացած հինգ փորձարկված միացությունները չափավոր վնասակար էին մեծահասակների համար՝ LC50-ները տատանվելով 140.79-ից մինչև 737.01 ppm (աղյուսակ 3): Սինթետիկ օրգանոֆոսֆորային մալաթիոնը պակաս հզոր էր, քան էուդեսմոլը և ավելի բարձր, քան մյուս վեց միացությունները՝ 5.44 ppm LC50 արժեքով 24-ժամյա ազդեցության ժամանակահատվածում (աղյուսակ 3, լրացուցիչ աղյուսակ 6):
Յոթ հզոր առաջատար միացություններ և օրգանոֆոսֆորային տամեֆոսատը ընտրվել են իրենց LC50 դեղաչափերի 1:1 հարաբերակցությամբ երկուական համակցություններ կազմելու համար: Պատրաստվել և ստուգվել է ընդհանուր առմամբ 28 երկուական համակցություն՝ Aedes aegypti-ի դեմ դրանց թրթուրասպան արդյունավետության համար: Ինը համակցություններ սիներգետիկ էին, 14-ը՝ անտագոնիստ, իսկ հինգը՝ ոչ թրթուրասպան: Սիներգետիկ համակցությունների շարքում դիալիլ դիսուլֆիդի և տեմոֆոլի համակցությունն ամենաարդյունավետն էր՝ 24 ժամ անց դիտարկված 100% մահացությամբ (աղյուսակ 4): Նմանապես, լիմոնենի և դիալիլ դիսուլֆիդի, ինչպես նաև էվգենոլի և թիմեթֆոսի խառնուրդները ցույց են տվել լավ ներուժ՝ դիտարկված թրթուրային մահացությամբ՝ 98.3% (աղյուսակ 5): Մնացած 4 համակցությունները՝ էվդեսմոլ գումարած էվկալիպտոլ, էվդեսմոլ գումարած լիմոնեն, էվկալիպտոլ գումարած ալֆա-պինեն, ալֆա-պինեն գումարած տեմեֆոս, նույնպես ցուցաբերել են նշանակալի թրթուրասպան արդյունավետություն՝ դիտարկված մահացության մակարդակով, որը գերազանցել է 90%-ը։ Ակնկալվող մահացության մակարդակը մոտ է 60-75%-ի (աղյուսակ 4): Այնուամենայնիվ, լիմոնենի և α-պինենի կամ էվկալիպտի համադրությունը ցուցաբերել է անտագոնիստական ռեակցիաներ: Նմանապես, Տեմեֆոսի և էվգենոլի կամ էվկալիպտի, կամ էվդեսմոլի կամ դիալիլ տրիսուլֆիդի խառնուրդները ունեցել են անտագոնիստական ազդեցություն: Նմանապես, դիալիլ դիսուլֆիդի և դիալիլ տրիսուլֆիդի համադրությունը և այս միացություններից որևէ մեկի համադրությունը էվդեսմոլի կամ էվգենոլի հետ անտագոնիստական են իրենց թրթուրասպան ազդեցությամբ: Անտագոնիզմ է նկատվել նաև էվդեսմոլի և էվգենոլի կամ α-պինենի համադրության դեպքում:
Մեծահասակների թթվային ակտիվության համար փորձարկված բոլոր 28 երկուական խառնուրդներից 7-ը սիներգետիկ էին, 6-ը՝ ոչ մի ազդեցություն չունեին, իսկ 15-ը՝ անտագոնիստական: Էվդեսմոլի և էվկալիպտի, ինչպես նաև լիմոնենի և կարվոնի խառնուրդները ավելի արդյունավետ էին, քան մյուս սիներգիստական համակցությունները՝ 24 ժամվա ընթացքում մահացության մակարդակները համապատասխանաբար կազմելով 76% և 100% (աղյուսակ 5): Մալաթիոնը սիներգետիկ ազդեցություն է ցուցաբերում միացությունների բոլոր համակցությունների հետ, բացառությամբ լիմոնենի և դիալիլ տրիսուլֆիդի: Մյուս կողմից, անտագոնիզմ է հայտնաբերվել դիալիլ դիսուլֆիդի և դիալիլ տրիսուլֆիդի, ինչպես նաև դրանցից որևէ մեկի և էվկալիպտի, կամ էվկալիպտոլի, կամ կարվոնի, կամ լիմոնենի համակցության միջև: Նմանապես, α-պինենի և էվդեսմոլի կամ լիմոնենի, էվկալիպտոլի և կարվոնի կամ լիմոնենի, և լիմոնենի և էվդեսմոլի կամ մալաթիոնի համակցությունները ցուցաբերել են անտագոնիստական թրթուրասպան ազդեցություն: Մնացած վեց համակցությունների դեպքում սպասվող և դիտարկված մահացության միջև էական տարբերություն չկար (տե՛ս աղյուսակ 5):
Սիներգետիկ ազդեցությունների և ենթամահացու դեղաչափերի հիման վրա, Aedes aegypti մոծակների մեծ թվի դեմ դրանց թրթուրասպան թունավորությունը վերջնականապես ընտրվել և հետագայում փորձարկվել է: Արդյունքները ցույց են տվել, որ էվգենոլ-լիմոնեն, դիալիլ դիսուլֆիդ-լիմոնեն և դիալիլ դիսուլֆիդ-տիմեֆոս երկուական համակցությունների միջոցով դիտարկված թրթուրային մահացությունը կազմել է 100%, մինչդեռ թրթուրային մահացության սպասվող ցուցանիշը համապատասխանաբար կազմել է 76.48%, 72.16% և 63.4% (աղյուսակ 6): Լիմոնենի և էվդեսմոլի համադրությունը համեմատաբար պակաս արդյունավետ էր՝ 24-ժամյա ազդեցության ժամանակահատվածում դիտարկվել է թրթուրային մահացության 88% (աղյուսակ 6): Ամփոփելով՝ ընտրված չորս երկուական համակցությունները նաև ցույց են տվել սիներգետիկ թրթուրասպան ազդեցություն Aedes aegypti-ի դեմ, երբ կիրառվել են մեծ մասշտաբով (աղյուսակ 6):
Ադուլտոցիդային կենսափորձարկման համար ընտրվել են երեք սիներգետիկ համակցություններ՝ չափահաս Aedes aegypti-ի մեծ պոպուլյացիաները վերահսկելու համար: Մեծ միջատների գաղութների վրա փորձարկման համար համակցություններ ընտրելու համար մենք նախ կենտրոնացանք երկու լավագույն սիներգիստական տերպենների համակցությունների վրա՝ կարվոն + լիմոնեն և էվկալիպտոլ + էվդեմոլ: Երկրորդ, լավագույն սիներգիստական համակցությունն ընտրվել է սինթետիկ օրգանոֆոսֆատային մալաթիոնի և տերպենոիդների համադրությունից: Մենք կարծում ենք, որ մալաթիոնի և էվդեմոլի համադրությունը լավագույն համադրությունն է խոշոր միջատների գաղութների վրա փորձարկման համար՝ դիտարկված ամենաբարձր մահացության և թեկնածու բաղադրիչների շատ ցածր LC50 արժեքների պատճառով: Մալաթիոնը սիներգիզմ է ցուցաբերում α-պինենի, դիալիլ դիսուլֆիդի, էվկալիպտի, կարվոնի և էվդեմոլի հետ համատեղ: Սակայն եթե նայենք LC50 արժեքներին, էվդեմոլն ունի ամենացածր արժեքը (2.25 ppm): Մալաթիոնի, α-պինենի, դիալիլ դիսուլֆիդի, էվկալիպտոլի և կարվոնի հաշվարկված LC50 արժեքները համապատասխանաբար կազմել են 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 և 140.79 ppm: Այս արժեքները ցույց են տալիս, որ մալաթիոնի և էվդեսմոլի համադրությունը դեղաչափի առումով օպտիմալ համադրություն է: Արդյունքները ցույց են տվել, որ կարվոնի և լիմոնենի, ինչպես նաև էվդեսմոլի և մալաթիոնի համադրություններում դիտվել է 100% մահացություն՝ համեմատած 61%-65% սպասվող մահացության հետ: Մեկ այլ համադրություն՝ էվդեսմոլ և էվկալիպտոլ, 24 ժամյա ազդեցությունից հետո ցույց է տվել 78.66% մահացության մակարդակ՝ համեմատած 60% սպասվող մահացության մակարդակի հետ: Ընտրված երեք համակցություններն էլ ցուցաբերել են սիներգետիկ ազդեցություն նույնիսկ մեծ մասշտաբով չափահաս Aedes aegypti-ի նկատմամբ կիրառվելիս (տե՛ս աղյուսակ 6):
Այս ուսումնասիրության մեջ ընտրված բուսական օքսիդանտները, ինչպիսիք են Mp, As, Os, Em և Cl, խոստումնալից մահացու ազդեցություն են ցուցաբերել Aedes aegypti-ի թրթուրային և հասուն փուլերի վրա: Mp EO-ն ունեցել է ամենաբարձր թրթուրասպան ակտիվությունը՝ 0.42 ppm LC50 արժեքով, որին հաջորդում են As, Os և Em EO-ները՝ 24 ժամ անց 50 ppm-ից պակաս LC50 արժեքով: Այս արդյունքները համապատասխանում են մոծակների և այլ երկկենցաղ ճանճերի վերաբերյալ նախորդ ուսումնասիրություններին10,11,12,13,14: Չնայած Cl-ի թրթուրասպան ազդեցությունը ավելի ցածր է, քան մյուս եթերային յուղերի դեպքում՝ 24 ժամ անց 163.65 ppm LC50 արժեքով, դրա հասուն ներուժը ամենաբարձրն է՝ 24 ժամ անց 23.37 ppm LC50 արժեքով: Mp, As և Em EO-ները նույնպես ցուցաբերեցին լավ ալերսպան ներուժ՝ LC50 արժեքներով 100-120 ppm միջակայքում 24 ժամյա ազդեցության դեպքում, բայց համեմատաբար ցածր էին, քան դրանց թրթուրասպան արդյունավետությունը: Մյուս կողմից, EO Os-ը ցուցաբերեց աննշան ալերսպան ազդեցություն նույնիսկ ամենաբարձր թերապևտիկ դեղաչափի դեպքում: Այսպիսով, արդյունքները ցույց են տալիս, որ էթիլենօքսիդի թունավորությունը բույսերի համար կարող է տարբեր լինել՝ կախված մոծակների զարգացման փուլից15: Այն նաև կախված է EO-ների միջատի մարմին ներթափանցման արագությունից, դրանց փոխազդեցությունից որոշակի թիրախային ֆերմենտների հետ և մոծակի դետոքսիկացիոն ունակությունից յուրաքանչյուր զարգացման փուլում16: Մեծ թվով ուսումնասիրություններ ցույց են տվել, որ հիմնական բաղադրիչ միացությունը կարևոր գործոն է էթիլենօքսիդի կենսաբանական ակտիվության մեջ, քանի որ այն կազմում է ընդհանուր միացությունների մեծ մասը3,12,17,18: Հետևաբար, մենք յուրաքանչյուր EO-ում դիտարկել ենք երկու հիմնական միացություն: Գլյուկոզա-Մարմնի խտության (GC-MS) արդյունքների հիման վրա դիալիլ դիսուլֆիդը և դիալիլ տրիսուլֆիդը նույնականացվել են որպես EO As-ի հիմնական միացություններ, ինչը համապատասխանում է նախորդ հաշվետվություններին19,20,21: Չնայած նախորդ հաշվետվությունները ցույց էին տալիս, որ մենթոլը դրա հիմնական միացություններից մեկն է, կարվոնը և լիմոնենը կրկին նույնականացվել են որպես Mp EO22,23-ի հիմնական միացություններ: Os EO-ի կազմի պրոֆիլը ցույց է տվել, որ էվգենոլը և մեթիլ էվգենոլը հիմնական միացություններն են, ինչը նման է նախորդ հետազոտողների եզրակացություններին16,24: Էվկալիպտոլը և էվկալիպտոլը նշվել են որպես Em տերևի յուղում առկա հիմնական միացություններ, ինչը համապատասխանում է որոշ հետազոտողների եզրակացություններին25,26, բայց հակասում է Օլալադեի և այլոց եզրակացություններին27: Ցինեոլի և α-պինենի գերիշխանությունը նկատվել է մելալեուկայի եթերայուղում, ինչը նման է նախորդ ուսումնասիրություններին28,29: Նույն բույսի տեսակից տարբեր վայրերում արդյունահանված եթերայուղերի կազմի և կոնցենտրացիայի ներտեսակային տարբերություններ են հաղորդվել և դիտարկվել նաև այս ուսումնասիրության մեջ, որոնք կախված են բույսերի աճի աշխարհագրական պայմաններից, բերքահավաքի ժամանակից, զարգացման փուլից կամ բույսի տարիքից, քեմոտիպերի տեսքից և այլն:22,30,31,32: Այնուհետև նույնականացված հիմնական միացությունները գնվել և փորձարկվել են դրանց թրթուրասպան ազդեցության և Aedes aegypti չափահաս մոծակների վրա ազդեցության համար: Արդյունքները ցույց են տվել, որ դիալիլ դիսուլֆիդի թրթուրասպան ակտիվությունը համեմատելի է հում EOAs-ի հետ: Սակայն դիալիլ տրիսուլֆիդի ակտիվությունն ավելի բարձր է, քան EOAs-ինը: Այս արդյունքները նման են Kimbaris-ի և այլոց կողմից Culex philippines-ի վրա ստացված արդյունքներին: Այնուամենայնիվ, այս երկու միացությունները լավ ինքնասպան ակտիվություն չեն ցուցաբերել թիրախային մոծակների դեմ, ինչը համապատասխանում է Plata-Rueda-ի և այլոց կողմից Tenebrio molitor-ի վրա կատարված արդյունքներին: Os EO-ն արդյունավետ է Aedes aegypti-ի թրթուրային փուլի դեմ, բայց ոչ չափահաս փուլի դեմ: Հաստատվել է, որ հիմնական առանձին միացությունների թրթուրասպան ակտիվությունը ցածր է, քան հում Os EO-ինը: Սա ենթադրում է այլ միացությունների դերը և դրանց փոխազդեցությունները հում էթիլենօքսիդում: Միայն մեթիլ էվգենոլն ունի աննշան ակտիվություն, մինչդեռ միայն էվգենոլն ունի չափավոր թրթուրասպան ակտիվություն: Այս եզրակացությունը, մի կողմից, հաստատում է35,36, մյուս կողմից, հակասում է նախորդ հետազոտողների եզրակացություններին37,38: Էվգենոլի և մեթիլեուգենոլի ֆունկցիոնալ խմբերի տարբերությունները կարող են հանգեցնել տարբեր թունավորության նույն թիրախային միջատի համար39: Պարզվել է, որ լիմոնենն ունի չափավոր թրթուրասպան ակտիվություն, մինչդեռ կարվոնի ազդեցությունը աննշան էր: Նմանապես, չափահաս միջատների համար լիմոնենի համեմատաբար ցածր թունավորությունը և կարվոնի բարձր թունավորությունը հաստատում են որոշ նախորդ ուսումնասիրությունների արդյունքները40, բայց հակասում են մյուսներին41: Կրկնակի կապերի առկայությունը ինչպես ներցիկլիկ, այնպես էլ էկզոցիկլիկ դիրքերում կարող է մեծացնել այս միացությունների առավելությունները որպես լարվիցիդներ3,41, մինչդեռ կարվոնը, որը կետոն է՝ չհագեցած ալֆա և բետա ածխածիններով, կարող է ցուցաբերել թունավորության ավելի բարձր ներուժ մեծահասակների մոտ42: Այնուամենայնիվ, լիմոնենի և կարվոնի անհատական բնութագրերը շատ ավելի ցածր են, քան ընդհանուր EO Mp-ն (աղյուսակ 1, աղյուսակ 3): Փորձարկված տերպենոիդների շարքում էվդեմոլն ունի ամենամեծ թրթուրասպան և մեծահասակների դեմ պայքարի ակտիվությունը՝ LC50 արժեքը 2.5 ppm-ից ցածր, ինչը այն դարձնում է խոստումնալից միացություն Aedes մոծակների դեմ պայքարի համար: Դրա արդյունավետությունն ավելի լավ է, քան ամբողջ EO Em-ինը, չնայած սա չի համապատասխանում Չենգի և այլոց եզրակացություններին40: Էվդեմոլը սեսկվիտերպեն է՝ երկու իզոպրենային միավորներով, որն ավելի քիչ ցնդող է, քան թթվածնավորված մոնոտերպենները, ինչպիսին է էվկալիպտը, և, հետևաբար, ունի ավելի մեծ ներուժ որպես թունաքիմիկատ: Էվկալիպտոլն ինքնին ունի ավելի մեծ չափահաս, քան թրթուրասպան ակտիվություն, և նախորդ ուսումնասիրությունների արդյունքները և՛ հաստատում, և՛ հերքում են սա37,43,44: Միայնակ ակտիվությունը գրեթե համեմատելի է ամբողջ EO Cl-ի ակտիվության հետ: Մեկ այլ երկցիկլիկ մոնոտերպեն՝ α-պինենը, Aedes aegypti-ի վրա ունի ավելի քիչ չափահաս ազդեցություն, քան թրթուրասպան ազդեցություն, որը հակառակն է ամբողջական EO Cl-ի ազդեցությանը: Տերպենոիդների ընդհանուր միջատասպան ակտիվությունը կախված է դրանց լիպոֆիլությունից, ցնդողականությունից, ածխածնի ճյուղավորումից, ելուստի մակերեսից, մակերեսից, ֆունկցիոնալ խմբերից և դրանց դիրքերից45,46: Այս միացությունները կարող են գործել՝ ոչնչացնելով բջիջների կուտակումները, արգելափակելով շնչառական ակտիվությունը, ընդհատելով նյարդային ազդակների փոխանցումը և այլն:47 Սինթետիկ օրգանոֆոսֆատ Temephos-ը ցուցաբերել է ամենաբարձր թրթուրասպան ակտիվությունը՝ LC50 արժեքը՝ 0.43 ppm, որը համապատասխանում է Լեկի տվյալներին -Utala48: Սինթետիկ օրգանոֆոսֆատ մալաթիոնի չափահաս ակտիվությունը գրանցվել է 5.44 ppm: Չնայած այս երկու օրգանոֆոսֆատները դրական արձագանք են ցուցաբերել Aedes aegypti-ի լաբորատոր շտամների նկատմամբ, աշխարհի տարբեր մասերում հաղորդվել է այս միացությունների նկատմամբ մոծակների դիմադրողականության մասին49: Այնուամենայնիվ, բուսական դեղամիջոցների նկատմամբ դիմադրողականության զարգացման վերաբերյալ նմանատիպ հաղորդագրություններ չեն հայտնաբերվել50: Այսպիսով, բուսական պատրաստուկները համարվում են քիմիական թունաքիմիկատների պոտենցիալ այլընտրանքներ վեկտորների վերահսկման ծրագրերում:
Թրթուրասպան ազդեցությունը փորձարկվել է 28 բինար համակցությունների (1:1) վրա, որոնք պատրաստվել են ուժեղ տերպենոիդներից և թիմեթֆոսով տերպենոիդներից, և 9 համակցություններ եղել են սիներգիստ, 14-ը՝ անտագոնիստ և 5-ը՝ անտագոնիստ։ Ազդեցություն չի եղել։ Մյուս կողմից, մեծահասակների արդյունավետության կենսափորձարկման ժամանակ 7 համակցություններ եղել են սիներգիստ, 15-ը՝ անտագոնիստ, իսկ 6 համակցություններ՝ ոչ մի ազդեցություն չեն ունեցել։ Որոշակի համակցությունների սիներգիստ ազդեցություն առաջացնելու պատճառը կարող է լինել թեկնածու միացությունների միաժամանակյա փոխազդեցությունը տարբեր կարևոր ուղիներում կամ որոշակի կենսաբանական ուղու տարբեր հիմնական ֆերմենտների հաջորդական արգելակումը51։ Լիմոնենի համակցությունը դիալիլ դիսուլֆիդի, էվկալիպտի կամ էվգենոլի հետ սիներգիստ է եղել թե՛ փոքր, թե՛ մեծ մասշտաբի կիրառություններում (աղյուսակ 6), մինչդեռ դրա համակցությունը էվկալիպտի կամ α-պինենի հետ ունեցել է անտագոնիստ ազդեցություն թրթուրների վրա։ Միջին հաշվով, լիմոնենը, կարծես, լավ սիներգիստ է, հնարավոր է՝ մեթիլ խմբերի առկայության, եղջերաթաղանթի մեջ լավ ներթափանցման և գործողության տարբեր մեխանիզմի շնորհիվ52,53: Նախկինում հաղորդվել է, որ լիմոնենը կարող է թունավոր ազդեցություններ առաջացնել՝ թափանցելով միջատների կուտիկուլների մեջ (շփման թունավորություն), ազդելով մարսողական համակարգի վրա (հակակերային միջոց) կամ շնչառական համակարգի վրա (ֆումիգացիոն ակտիվություն),54 մինչդեռ ֆենիլպրոպանոիդները, ինչպիսին է էվգենոլը, կարող են ազդել նյութափոխանակության ֆերմենտների վրա55: Հետևաբար, գործողության տարբեր մեխանիզմներով միացությունների համադրությունները կարող են մեծացնել խառնուրդի ընդհանուր մահացու ազդեցությունը: Պարզվել է, որ էվկալիպտոլը սիներգիստ է դիալիլ դիսուլֆիդի, էվկալիպտի կամ α-պինենի հետ, բայց այլ միացությունների հետ այլ համադրությունները կամ թրթուրասպան չեն եղել, կամ անտագոնիստ են եղել: Վաղ ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ էվկալիպտոլը արգելակող ակտիվություն ունի ացետիլխոլինէսթերազի (AChE), ինչպես նաև օկտամամինի և GABA ընկալիչների վրա56: Քանի որ ցիկլիկ մոնոտերպենները, էվկալիպտոլը, էվգենոլը և այլն կարող են ունենալ նույն գործողության մեխանիզմը, ինչ իրենց նյարդաթունավոր ակտիվությունը,57 այդպիսով նվազագույնի հասցնելով դրանց համակցված ազդեցությունները փոխադարձ արգելակման միջոցով: Նմանապես, Տեմեֆոսի համադրությունը դիալիլ դիսուլֆիդի, α-պինենի և լիմոնենի հետ սիներգետիկ է եղել, ինչը հաստատել է բուսական արտադրանքի և սինթետիկ օրգանոֆոսֆատների միջև սիներգետիկ ազդեցության վերաբերյալ նախորդ հաղորդագրությունները58:
Էվդեսմոլի և էվկալիպտոլի համադրությունը սիներգիստական ազդեցություն է ունեցել Aedes aegypti-ի թրթուրային և չափահաս փուլերի վրա, հնարավոր է՝ պայմանավորված նրանց տարբեր քիմիական կառուցվածքներով։ Էվդեսմոլը (սեսկվիտերպեն) կարող է ազդել շնչառական համակարգի վրա 59, իսկ էվկալիպտոլը (մոնոտերպեն)՝ ացետիլխոլինէսթերազի վրա 60։ Բաղադրիչների երկու կամ ավելի թիրախային տեղամասերի միաժամանակյա ազդեցությունը կարող է ուժեղացնել համադրության ընդհանուր մահացու ազդեցությունը։ Մեծահասակների համար նյութերի կենսափորձարկումներում մալաթիոնը սիներգետիկ է եղել կարվոնի կամ էվկալիպտոլի կամ էվկալիպտոլի կամ դիալիլ դիսուլֆիդի կամ α-պինենի հետ, ինչը ցույց է տալիս, որ այն սիներգիստական է լիմոնենի և դի-ի ավելացման հետ։ Լավ սիներգիստական ալերսպան թեկնածուներ են տերպենային միացությունների ամբողջ պորտֆելի համար, բացառությամբ ալիլ տրիսուլֆիդի։ Թանգամը և Կաթիրեսանը61 նույնպես հաղորդել են մալաթիոնի և բուսական քաղվածքների սիներգետիկ ազդեցության նմանատիպ արդյունքների մասին: Այս սիներգետիկ արձագանքը կարող է պայմանավորված լինել մալաթիոնի և ֆիտոքիմիական նյութերի համակցված թունավոր ազդեցությամբ միջատների դետոքսիկացնող ֆերմենտների վրա: Օրգանոֆոսֆատները, ինչպիսին է մալաթիոնը, սովորաբար գործում են ցիտոքրոմ P450 էսթերազները և մոնոօքսիգենազները արգելակելով62,63,64: Հետևաբար, մալաթիոնի և տարբեր գործողության մեխանիզմներով տերպենների համադրությունը կարող է ուժեղացնել մոծակների վրա ընդհանուր մահացու ազդեցությունը:
Մյուս կողմից, անտագոնիզմը ցույց է տալիս, որ ընտրված միացությունները համակցված վիճակում ավելի քիչ ակտիվ են, քան յուրաքանչյուր միացություն առանձին: Որոշ համակցություններում անտագոնիզմի պատճառը կարող է լինել այն, որ մեկ միացությունը փոփոխում է մյուս միացության վարքագիծը՝ փոխելով կլանման, բաշխման, նյութափոխանակության կամ արտազատման արագությունը: Վաղ շրջանի հետազոտողները սա համարում էին դեղերի համակցություններում անտագոնիզմի պատճառ: Մոլեկուլներ Հնարավոր մեխանիզմ 65: Նմանապես, անտագոնիզմի հնարավոր պատճառները կարող են կապված լինել գործողության նմանատիպ մեխանիզմների, նույն ընկալիչի կամ թիրախային տեղամասի համար բաղադրիչ միացությունների մրցակցության հետ: Որոշ դեպքերում կարող է տեղի ունենալ նաև թիրախային սպիտակուցի ոչ մրցակցային արգելակում: Այս ուսումնասիրության մեջ երկու օրգանոսուլֆուրային միացություններ՝ դիալիլ դիսուլֆիդը և դիալիլ տրիսուլֆիդը, ցուցաբերել են անտագոնիստական ազդեցություններ, հնարավոր է՝ նույն թիրախային տեղամասի համար մրցակցության պատճառով: Նմանապես, այս երկու ծծմբային միացությունները ցուցաբերել են անտագոնիստական ազդեցություններ և ազդեցություն չեն ունեցել էվդեմոլի և α-պինենի հետ համակցված: Էվդեմոլը և ալֆա-պինենը ցիկլիկ բնույթ ունեն, մինչդեռ դիալիլ դիսուլֆիդը և դիալիլ տրիսուլֆիդը բնույթով ալիֆատիկ են: Քիմիական կառուցվածքի հիման վրա, այս միացությունների համադրությունը պետք է մեծացնի ընդհանուր մահացու ակտիվությունը, քանի որ դրանց թիրախային տեղամասերը սովորաբար տարբեր են34,47, բայց փորձարարականորեն մենք հայտնաբերեցինք անտագոնիզմ, որը կարող է պայմանավորված լինել այս միացությունների դերով որոշ անհայտ օրգանիզմների in vivo համակարգերում՝ փոխազդեցության արդյունքում: Նմանապես, ցինոլի և α-պինենի համադրությունը առաջացրել է անտագոնիստական պատասխաններ, չնայած հետազոտողները նախկինում հայտնել են, որ երկու միացություններն ունեն գործողության տարբեր թիրախներ47,60: Քանի որ երկու միացություններն էլ ցիկլիկ մոնոտերպեններ են, կարող են լինել որոշ ընդհանուր թիրախային տեղամասեր, որոնք կարող են մրցակցել կապման համար և ազդել ուսումնասիրված կոմբինատոր զույգերի ընդհանուր թունավորության վրա:
LC50 արժեքների և դիտարկված մահացության հիման վրա ընտրվել են երկու լավագույն սիներգիստական տերպենային համակցությունները՝ կարվոն + լիմոնեն և էվկալիպտոլ + էվդեմոլ զույգերը, ինչպես նաև սինթետիկ օրգանոֆոսֆորային մալաթիոնը՝ տերպեններով: Մալաթիոն + էվդեմոլ միացությունների օպտիմալ սիներգիստական համակցությունը փորձարկվել է մեծահասակների միջատասպանների կենսափորձարկման մեջ: Նպատակային կերպով թիրախավորեք միջատների խոշոր գաղութները՝ հաստատելու համար, թե արդյոք այս արդյունավետ համակցությունները կարող են աշխատել մեծ թվով անհատների դեմ համեմատաբար մեծ ազդեցության տարածքներում: Այս բոլոր համակցությունները ցուցաբերում են սիներգիստական ազդեցություն միջատների մեծ խմբերի դեմ: Նմանատիպ արդյունքներ են ստացվել Aedes aegypti թրթուրների մեծ պոպուլյացիաների դեմ փորձարկված օպտիմալ սիներգիստական թրթուրասպան համակցության համար: Այսպիսով, կարելի է ասել, որ բույսերի EO միացությունների արդյունավետ սիներգիստական թրթուրասպան և չափահասների դեմ պայքարի համակցությունը հզոր թեկնածու է առկա սինթետիկ քիմիական նյութերի դեմ և կարող է հետագայում օգտագործվել Aedes aegypti պոպուլյացիաները վերահսկելու համար: Նմանապես, սինթետիկ լարվիցիդների կամ ադուլտիդների և տերպենների արդյունավետ համակցությունները կարող են օգտագործվել նաև մոծակներին տրվող թիմեթֆոսի կամ մալաթիոնի դեղաչափերը նվազեցնելու համար: Այս հզոր սիներգետիկ համակցությունները կարող են լուծումներ տալ Aedes մոծակների մոտ դեղորայքային դիմադրության զարգացման վերաբերյալ ապագա ուսումնասիրությունների համար:
Aedes aegypti-ի ձվերը հավաքվել են Դիբրուգարհի տարածաշրջանային բժշկական հետազոտությունների կենտրոնից, Հնդկաստանի բժշկական հետազոտությունների խորհրդից և պահվել են վերահսկվող ջերմաստիճանի (28 ± 1 °C) և խոնավության (85 ± 5%) պայմաններում, Գաուհատի համալսարանի կենդանաբանության ամբիոնում՝ հետևյալ պայմաններում. նկարագրվել են Արիվոլիները և այլք: Ձվից դուրս գալուց հետո թրթուրներին կերակրել են թրթուրային կերով (շան համար նախատեսված թխվածքաբլիթի փոշի և խմորիչ՝ 3:1 հարաբերակցությամբ), իսկ չափահասներին՝ 10% գլյուկոզի լուծույթով: Դուրս գալուց հետո 3-րդ օրվանից սկսած՝ չափահաս էգ մոծակներին թույլատրվել է ծծել ալբինոս առնետների արյունը: Զտիչ թուղթը թրջել ջրի մեջ բաժակի մեջ և տեղադրել ձվադրման վանդակում:
Ընտրված բույսերի նմուշներ՝ էվկալիպտի տերևներ (Myrtaceae), սուրբ ռեհան (Lamiaceae), անանուխ (Lamiaceae), մելալեուկա (Myrtaceae) և ալիումի սոխուկներ (Amaryllidaceae): Հավաքվել են Գուվահատիից և նույնականացվել Գաուհատի համալսարանի բուսաբանության ամբիոնի կողմից: Հավաքված բույսերի նմուշները (500 գ) ենթարկվել են հիդրոդիստիլյացիայի՝ օգտագործելով Clevenger սարքավորումը 6 ժամվա ընթացքում: Արդյունահանված EO-ն հավաքվել է մաքուր ապակե սրվակների մեջ և պահվել 4°C ջերմաստիճանում՝ հետագա ուսումնասիրության համար:
Թրթուրների դեմ թունավորությունը ուսումնասիրվել է Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպության ստանդարտ ընթացակարգերի 67 փոքր-ինչ փոփոխված տարբերակով: Որպես էմուլգատոր՝ օգտագործեք DMSO-ն: Յուրաքանչյուր EO կոնցենտրացիան սկզբում փորձարկվել է 100 և 1000 ppm կոնցենտրացիաներով՝ յուրաքանչյուր կրկնության մեջ բացահայտելով 20 թրթուր: Արդյունքների հիման վրա կիրառվել է կոնցենտրացիայի միջակայք, և մահացությունը գրանցվել է 1 ժամից մինչև 6 ժամ (1 ժամյա ընդմիջումներով), ինչպես նաև մշակումից 24 ժամ, 48 ժամ և 72 ժամ հետո: Ենթամահացու կոնցենտրացիաները (LC50) որոշվել են 24, 48 և 72 ժամ ազդեցությունից հետո: Յուրաքանչյուր կոնցենտրացիա փորձարկվել է եռակի՝ մեկ բացասական վերահսկողության (միայն ջուր) և մեկ դրական վերահսկողության (DMSO-ով մշակված ջուր) հետ միասին: Եթե տեղի է ունենում բոոպացիա և վերահսկիչ խմբի թրթուրների ավելի քան 10%-ը մահանում է, փորձը կրկնվում է: Եթե վերահսկիչ խմբում մահացության մակարդակը 5-10% է, օգտագործեք Abbott-ի ուղղման բանաձևը 68:
Ռամարի և այլոց կողմից նկարագրված մեթոդը 69 օգտագործվել է Aedes aegypti-ի դեմ չափահաս կենսաբանական փորձարկման համար՝ օգտագործելով ացետոնը որպես լուծիչ: Յուրաքանչյուր EO սկզբում փորձարկվել է չափահաս Aedes aegypti մոծակների դեմ՝ 100 և 1000 ppm կոնցենտրացիաներով: Յուրաքանչյուր պատրաստված լուծույթից 2 մլ ավելացրեք Ուոթմանի թվին: 1 կտոր ֆիլտրի թուղթ (չափսը՝ 12 x 15 սմ2) և թողեք, որ ացետոնը գոլորշիանա 10 րոպե: Որպես վերահսկիչ օգտագործվել է միայն 2 մլ ացետոնով մշակված ֆիլտրի թուղթը: Ացետոնի գոլորշիացումից հետո մշակված ֆիլտրի թուղթը և վերահսկիչ ֆիլտրի թուղթը տեղադրվում են գլանաձև խողովակի մեջ (10 սմ խորությամբ): Տասը 3-4 օրական արյուն չսնվող մոծակներ տեղափոխվել են յուրաքանչյուր կոնցենտրացիայի եռակի մասերի: Նախնական փորձարկումների արդյունքների հիման վրա փորձարկվել են ընտրված յուղերի տարբեր կոնցենտրացիաներ: Մահացությունը գրանցվել է մոծակի արձակումից 1 ժամ, 2 ժամ, 3 ժամ, 4 ժամ, 5 ժամ, 6 ժամ, 24 ժամ, 48 ժամ և 72 ժամ հետո: Հաշվարկեք LC50 արժեքները 24 ժամ, 48 ժամ և 72 ժամ ազդեցության ժամանակների համար: Եթե վերահսկիչ խմբում մահացության մակարդակը գերազանցում է 20%-ը, կրկնեք ամբողջ թեստը: Նմանապես, եթե վերահսկիչ խմբում մահացության մակարդակը մեծ է 5%-ից, ճշգրտեք մշակված նմուշների արդյունքները՝ օգտագործելով Աբբոտի բանաձևը68:
Ընտրված եթերային յուղերի բաղադրիչ միացությունները վերլուծելու համար իրականացվել են գազային քրոմատոգրաֆիա (Agilent 7890A) և զանգվածային սպեկտրոմետրիա (Accu TOF GCv, Jeol): Գազային քրոմատոգրաֆիան հագեցած էր FID դետեկտորով և մազանոթային սյունակով (HP5-MS): Կրող գազը հելիում էր, հոսքի արագությունը՝ 1 մլ/րոպե: GC ծրագիրը Allium sativum-ը սահմանում է 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M, իսկ Ocimum Sainttum-ը՝ 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, անանուխի համար՝ 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, էվկալիպտի համար՝ 20.60-1M-10-200-3M-30-280, իսկ կարմիրի համար՝ հազար շերտի համար՝ 10:60-1M-8-220-5M-8-270-3M:
Յուրաքանչյուր EO-ի հիմնական միացությունները նույնականացվել են գազային քրոմատոգրամի և զանգվածային սպեկտրոմետրիայի արդյունքներից հաշվարկված մակերեսի տոկոսի հիման վրա (հղում NIST 70 ստանդարտների տվյալների բազային):
Յուրաքանչյուր EO-ի մեջ պարունակվող երկու հիմնական միացությունները ընտրվել են GC-MS արդյունքների հիման վրա և գնվել են Sigma-Aldrich-ից 98–99% մաքրությամբ՝ հետագա կենսափորձարկումների համար: Միացությունները ստուգվել են Aedes aegypti-ի դեմ թրթուրասպան և չափահասների արդյունավետության համար, ինչպես նկարագրված է վերևում: Ամենատարածված սինթետիկ թրթուրասպան տամեֆոսատը (Sigma Aldrich) և չափահասների համար նախատեսված մալաթիոն դեղամիջոցը (Sigma Aldrich) վերլուծվել են՝ ընտրված EO միացությունների հետ դրանց արդյունավետությունը համեմատելու համար՝ հետևելով նույն ընթացակարգին:
Ընտրված տերպենային և տերպենային միացությունների, ինչպես նաև առևտրային օրգանոֆոսֆատների (տիլեֆոս և մալաթիոն) երկուական խառնուրդներ պատրաստվել են՝ յուրաքանչյուր թեկնածու միացության LC50 դոզան խառնելով 1:1 հարաբերակցությամբ: Պատրաստված համակցությունները փորձարկվել են Aedes aegypti-ի թրթուրային և չափահաս փուլերի վրա, ինչպես նկարագրված է վերևում: Յուրաքանչյուր կենսափորձարկում իրականացվել է եռակի՝ յուրաքանչյուր համակցության համար և եռակի՝ յուրաքանչյուր համակցության մեջ առկա առանձին միացությունների համար: Թիրախային միջատների մահը գրանցվել է 24 ժամ հետո: Հաշվարկեք երկուական խառնուրդի համար սպասվող մահացության մակարդակը՝ օգտագործելով հետևյալ բանաձևը:
որտեղ E = Aedes aegypti մոծակների սպասվող մահացության մակարդակը՝ ի պատասխան երկուական համակցության, այսինքն՝ կապի (A + B):
Յուրաքանչյուր երկուական խառնուրդի ազդեցությունը նշվել է որպես սիներգիստական, անտագոնիստական կամ առանց ազդեցության՝ հիմնվելով Pavla52-ի կողմից նկարագրված մեթոդով հաշվարկված χ2 արժեքի վրա: Հաշվարկեք χ2 արժեքը յուրաքանչյուր համակցության համար՝ օգտագործելով հետևյալ բանաձևը:
Համակցության ազդեցությունը սահմանվել է որպես սիներգետիկ, երբ հաշվարկված χ2 արժեքը մեծ է եղել ազատության համապատասխան աստիճանների աղյուսակային արժեքից (95% վստահության միջակայք) և եթե դիտարկված մահացությունը գերազանցել է սպասվող մահացությունը։ Նմանապես, եթե որևէ համակցության համար հաշվարկված χ2 արժեքը գերազանցում է որոշ ազատության աստիճաններով աղյուսակային արժեքը, բայց դիտարկված մահացությունը ցածր է սպասվող մահացությունից, բուժումը համարվում է անտագոնիստական։ Եվ եթե որևէ համակցության դեպքում χ2-ի հաշվարկված արժեքը փոքր է ազատության համապատասխան աստիճանների աղյուսակային արժեքից, համակցությունը համարվում է անարդյունավետ։
Մեծ թվով միջատների դեմ փորձարկման համար ընտրվել են երեքից չորս պոտենցիալ սիներգետիկ համակցություններ (100 թրթուր և 50 թրթուրասպան և չափահաս միջատների ակտիվություն): Մեծահասակները) շարունակում են վերը նշվածի պես: Խառնուրդների հետ մեկտեղ, ընտրված խառնուրդներում առկա առանձին միացությունները նույնպես փորձարկվել են Aedes aegypti թրթուրների և չափահասների հավասար թվով վրա: Համակցության հարաբերակցությունը մեկ թեկնածու միացության LC50 դոզայի մեկ մասն է և մյուս բաղադրիչ միացության LC50 դոզայի մի մասը: Մեծահասակների ակտիվության կենսափորձարկման ժամանակ ընտրված միացությունները լուծվել են լուծիչ ացետոնի մեջ և տեղադրվել 1300 սմ3 գլանաձև պլաստիկ տարայի մեջ փաթաթված ֆիլտրի թղթի վրա: Ացետոնը գոլորշիացվել է 10 րոպե, և չափահասները ազատ են արձակվել: Նմանապես, թրթուրասպան կենսափորձարկման ժամանակ LC50 թեկնածու միացությունների դեղաչափերը նախ լուծվել են DMSO-ի հավասար ծավալների մեջ, ապա խառնվել 1 լիտր ջրի հետ, որը պահվում է 1300 սմ3 պլաստիկ տարաների մեջ, և թրթուրները ազատ են արձակվել:
71 գրանցված մահացության տվյալների հավանականային վերլուծությունը կատարվել է SPSS (տարբերակ 16) և Minitab ծրագրաշարի միջոցով՝ LC50 արժեքները հաշվարկելու համար։
Հրապարակման ժամանակը. Հուլիս-01-2024